為了從動物組織中提取純凈的DNA,首先要快速、有效地消化裂解動物組織細胞。消化裂解動物組織常用的方法有蛋白酶(如蛋白酶K)水解、表面活性劑處理、變性劑處理等。某科研人員擬使用加酶洗衣粉消化裂解豬肌肉樣本,并提取豬的DNA.實驗步驟如下:
①取500mg剪碎的豬肌肉組織于離心管中,加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超純水混合,在一定溫度條件下水浴消化24h。
②加入苯酚、氯仿、異丙醇(25:24:1)混合液抽提。
③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴。
④加酸酸鈉和無水乙醇,4000r/min高速離心15min。
⑤用70%乙醇洗滌沉淀兩次,風干,得到高純度的DNA。
請回答有關(guān)問題:
(1)加酶洗衣粉可以消化裂解動物組織細胞的原理是洗衣粉中蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細胞膜洗衣粉中蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細胞膜。
(2)步驟②的目的是使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì)使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì)。步驟③的目的是水解RNA水解RNA。
(3)步驟④中使用無水乙醇的目的是析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA,高速離心時溫度保持在4℃的原因有降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子運動,易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韌性,減少斷裂)降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子運動,易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韌性,減少斷裂)。
(4)若是從血細胞中提取DNA,則選擇雞血雞血(選填“雞血”或“哺乳動物紅細胞”)。破碎細胞時,向血細胞液中加入一定量的蒸餾水蒸餾水,同時用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可。
【考點】酶的特性及應(yīng)用.
【答案】洗衣粉中蛋白酶和表面活性劑等可以破壞細胞膜;使蛋白質(zhì)變性,抽提蛋白質(zhì);水解RNA;析出DNA,提取含雜質(zhì)較少的DNA;降低核酸水解酶的活性,防止DNA降解;降低分子運動,易于形成沉淀析出(增加DNA分子的柔韌性,減少斷裂);雞血;蒸餾水
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:13引用:2難度:0.6
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