1型糖尿病是因免疫系統(tǒng)將自身胰島素作為抗原識別而引起的自身免疫病。小腸黏膜長期少量吸收胰島素抗原，能誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)識別該抗原后應(yīng)答減弱，從而緩解癥狀?？蒲腥藛T利用1型糖尿病模型小鼠進(jìn)行動物實驗，使乳酸菌在小鼠腸道內(nèi)持續(xù)產(chǎn)生人胰島素抗原，為此構(gòu)建重組表達(dá)載體，技術(shù)路線如圖。

據(jù)圖回答：
（1）很多啟動子具有物種特異性，上圖質(zhì)粒中的啟動子應(yīng)選擇

C

C

。
A．小鼠啟動子
B．人啟動子
C．乳酸菌啟動子
（2）在人胰島素A、B肽鏈編碼序列間引入一段短肽編碼序列，確保等比例表達(dá)A、B肽鏈。引入的短肽編碼序列不能含有

終止子序列、終止密碼子編碼序列

終止子序列、終止密碼子編碼序列

（答兩點）。
（3）在重組表達(dá)載體中，SacⅠ和XbaⅠ限制酶僅有圖示的酶切位點。用這兩種酶酶切重組表達(dá)載體，最多可能獲得

7

7

種大小不同的DNA片段。
（4）檢測轉(zhuǎn)化的乳酸菌發(fā)現(xiàn)，信號肽—重組人胰島素分布在細(xì)胞壁上。由此推測，信號肽的合成和運輸所經(jīng)歷的細(xì)胞結(jié)構(gòu)依次是

核糖體、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞壁

核糖體、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞壁

。
（5）為了確定重組人胰島素編碼序列的作用，以導(dǎo)入了重組表達(dá)載體的乳酸菌為實驗組，還應(yīng)設(shè)立2個對照組，分別為

（正常）乳酸菌、導(dǎo)入空載體的乳酸菌

（正常）乳酸菌、導(dǎo)入空載體的乳酸菌

。3組乳酸菌在特定的條件下培養(yǎng)一段時間后，檢測各組人胰島素的產(chǎn)生情況。