人類先天性肢體畸形是一種遺傳病，某研究小組對患者甲的家系進行了調查，結果如圖1。

（1）由圖1可知，該病為

常染色體隱性

常染色體隱性

遺傳病。EN1基因是肢體發(fā)育的關鍵基因。對患者甲和健康志愿者的EN1基因進行測序，結果如圖2。推測甲患病的可能原因是EN1基因的堿基對

增添

增添

，使其指導合成肽鏈的

氨基酸序列改變

氨基酸序列改變

，蛋白質的空間結構發(fā)生改變，導致肢體發(fā)育異常。若對Ⅱ-3個體的EN1基因進行測序，結果可能為

均與正?；蛐蛄幸恢禄蚣扔姓；蛐蛄杏钟型蛔兓蛐蛄?/div>

均與正常基因序列一致或既有正?；蛐蛄杏钟型蛔兓蛐蛄?/div>。
（2）對另一先天肢體畸形患者乙的相關基因進行測序，乙的EN1基因序列正常，但該基因附近有一段未知功能的DNA片段（MCR）缺失。研究人員對EN1基因正常，但MCR缺失的肢體畸形純合小鼠（E⁺E⁺M^-M^-）進行檢測，發(fā)現(xiàn)其EN1基因表達量顯著低于野生型。由此推測患者乙的致病機理為

由于MCR的缺失，使EN1基因表達量降低，導致患者肢體發(fā)育異常

由于MCR的缺失，使EN1基因表達量降低，導致患者肢體發(fā)育異常

。
（3）為確定MCR的作用機制，研究人員用表現(xiàn)型正常的MCR缺失雜合小鼠（E⁺E⁺ M⁺M^-）與表現(xiàn)型正常的EN1基因突變雜合小鼠（E⁺E^- M⁺M⁺）雜交，子代表現(xiàn)型及比例為發(fā)育正常：肢體畸形=3：1。
①子代肢體畸形小鼠的基因型為

E⁺E^-M⁺M^-

E⁺E^-M⁺M^-

。
②真核生物的轉錄調控大多是通過順式作用元件與反式作用因子相互作用而實現(xiàn)的。順式作用元件是指存在于基因旁側，能影響基因表達的DNA序列，如圖3中的增強子、TATA box；反式作用因子是一類蛋白質分子，通過與順式作用元件結合調控基因轉錄起始，如圖3中的

轉錄因子、TBP

轉錄因子、TBP

。

據(jù)此研究人員提出兩種假設：
假設一：MCR作為順式作用元件調控EN1基因的表達；
假設二：MCR的表達產(chǎn)物作為反式作用因子調控EN1基因的表達。
請根據(jù)雜交實驗結果判斷上述假設是否成立，并說明理由。

假設一成立，假設二不成立。若MCR為順式作用元件，基因型為E⁺E^-M⁺M^-的個體細胞中，一條染色體上存在正常的EN1基因但缺少MCR，導致EN1基因無法表達；另一條染色體上雖存在MCR，但沒有正常的EN1基因，無法表達正常蛋白。則該個體應表現(xiàn)為肢體畸形，與實驗結果一致；若MCR表達產(chǎn)物為反式作用因子，基因型為E⁺E^-M⁺M^-的個體可以表達出反式作用因子，調控正常的EN1基因表達。則該個體表現(xiàn)型正常，與實驗結果不符

假設一成立，假設二不成立。若MCR為順式作用元件，基因型為E⁺E^-M⁺M^-的個體細胞中，一條染色體上存在正常的EN1基因但缺少MCR，導致EN1基因無法表達；另一條染色體上雖存在MCR，但沒有正常的EN1基因，無法表達正常蛋白。則該個體應表現(xiàn)為肢體畸形，與實驗結果一致；若MCR表達產(chǎn)物為反式作用因子，基因型為E⁺E^-M⁺M^-的個體可以表達出反式作用因子，調控正常的EN1基因表達。則該個體表現(xiàn)型正常，與實驗結果不符

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