下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2 中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題。
(1)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng) SmaⅠ切割前后,分別含有 00,22個游離的磷酸基團(tuán)。
SmaⅠ切割斷裂 磷酸二酯磷酸二酯鍵,形成的末端與 EcoRⅠ形成的 不相同不相同(相同/不相同)
(2)若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入的 SmaⅠ酶切位點越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 高高。
(3)用圖中的質(zhì)粒和外源 DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用 SmaⅠ切割,原因是 SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗生素抗性基因、外源DNA中的目的基因SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗生素抗性基因、外源DNA中的目的基因。
(4)與只使用 EcoRⅠ相比較,使用 BamHⅠ和 HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源 DNA 的優(yōu)點在于可以防止 質(zhì)粒和目的其因自身環(huán)化或目的基因與載體反向連接質(zhì)粒和目的其因自身環(huán)化或目的基因與載體反向連接。
(5)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入 DNA連接DNA連接酶。
(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 便于鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞便于鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】0;2;磷酸二酯;不相同;高;SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗生素抗性基因、外源DNA中的目的基因;質(zhì)粒和目的其因自身環(huán)化或目的基因與載體反向連接;DNA連接;便于鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞
【解答】
【點評】
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