近期冷泉港實驗室專門為城市農(nóng)業(yè)培育了像葡萄一樣的小番茄,這種小番茄也適合在太空種植??茖W(xué)家利用基因突變將控制生長的終止基因(SP)改造為SP1基因,利用基因敲除(將同源DNA片段導(dǎo)入受體細(xì)胞,使同源DNA片段在原有位置替代了靶基因片段)的方法使小番茄的成熟期縮短為40天。如圖為SP基因兩端的序列和質(zhì)粒中相關(guān)的序列,已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是-G↓GATCC,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是-↓GATC。
回答下列問題:
(1)除限制酶以外,基因工程中常用的工具還有DNA連接酶、運載體DNA連接酶、運載體。在上述實例中,為了便于重組和篩選,需使用限制酶Ⅱ和限制酶Ⅰ限制酶Ⅱ和限制酶Ⅰ分別切割目的基因和質(zhì)粒。質(zhì)粒中標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。
(2)利用物理因素和化學(xué)因素處理SP基因可誘發(fā)SP基因突變誘發(fā)SP基因突變,使篩選出SP1基因的概率增大??衫?!--BA-->PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增SP1基因,將搭載SP1基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基困槍法、花粉管通道法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基困槍法、花粉管通道法(答出兩種)。
(3)利用SP1基因敲除SP基因?qū)儆谏镒儺愔械?!--BA-->基因重組基因重組,SP1基因成功表達(dá)的個體生物學(xué)水平鑒定標(biāo)準(zhǔn)為小番茄的成熟期約為40天小番茄的成熟期約為40天。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】DNA連接酶、運載體;限制酶Ⅱ和限制酶Ⅰ;鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來;誘發(fā)SP基因突變;PCR;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基困槍法、花粉管通道法;基因重組;小番茄的成熟期約為40天
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:3引用:1難度:0.7
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(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
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