番茄幼苗抗寒能力弱，為提高番茄植株的抗寒性，科學家利用基因工程將耐寒蛋白基因（LEA基因）導入番茄細胞中獲得轉(zhuǎn)基因植株。如圖為Ti質(zhì)粒和LEA基因的酶切位點，其中酶A、B、C均為限制性內(nèi)切核酸酶?；卮鹣铝杏嘘P基因工程的問題：
（1）獲取LEA基因的方法有 PCR技術、人工合成法和構建基因文庫PCR技術、人工合成法和構建基因文庫（答出兩種）。將Ti質(zhì)粒和LEA基因構建成基因表達載體需要利用酶 B和酶CB和酶C切割DNA，目的是 保證LEA基因插入T-DNA中并整合到番茄細胞染色體的DNA上；防止Ti質(zhì)粒和LEA基因自身環(huán)化；防止目的基因反向連接保證LEA基因插入T-DNA中并整合到番茄細胞染色體的DNA上；防止Ti質(zhì)粒和LEA基因自身環(huán)化；防止目的基因反向連接（答出兩點）。
（2）Ti質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因的作用是 篩選出含有目的基因（LEA基因）的重組質(zhì)粒篩選出含有目的基因（LEA基因）的重組質(zhì)粒。構建好的基因表達載體導入土壤農(nóng)桿菌前，需要用含Ca2+的溶液處理土壤農(nóng)桿菌，目的是 使土壤農(nóng)桿菌處于一種易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)使土壤農(nóng)桿菌處于一種易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（3）將導入基因表達載體的土壤農(nóng)桿菌與番茄根尖或莖尖制成的愈傷組織混合培養(yǎng)，最終可獲得番茄植株，該過程利用了 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術。為確保獲得的番茄植株是抗寒性較強的轉(zhuǎn)基因番茄植株，可在分子水平上進行 抗原一抗體雜交抗原一抗體雜交，檢測LEA基因是否翻譯成耐寒蛋白，也可對獲得的番茄植株進行耐寒性實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】PCR技術、人工合成法和構建基因文庫；B和酶C；保證LEA基因插入T-DNA中并整合到番茄細胞染色體的DNA上；防止Ti質(zhì)粒和LEA基因自身環(huán)化；防止目的基因反向連接；篩選出含有目的基因（LEA基因）的重組質(zhì)粒；使土壤農(nóng)桿菌處于一種易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)；植物組織培養(yǎng)；抗原一抗體雜交
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/7/21 8:0:9組卷：4引用：2難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7