[生物——選修1：生物技術實踐]
我國北方地區(qū)秋冬兩季平均氣溫較低，低溫環(huán)境使得秸稈難以自然降解，因此篩選低溫下高效木質素降解菌具有重要的生產(chǎn)價值。已知木質素能與苯胺藍結合形成藍色復合物?；卮鹣铝袉栴}：
（1）將5.0g土壤樣品加入200mL緩沖液中，15℃、120r/min振蕩混勻3h。靜置1h后取上清液分別稀釋到101～109倍，取0.1mL稀釋液采用 稀釋涂布平板稀釋涂布平板法分別接種到含木質素的培養(yǎng)基上；從功能上講，含木質素的培養(yǎng)基屬于 選擇選擇培養(yǎng)基。
（2）采用苯胺藍培養(yǎng)基篩選木質素降解菌時，根據(jù)培養(yǎng)基上 有無透明圈和透明圈的直徑有無透明圈和透明圈的直徑可初步篩選出產(chǎn)木質素降解酶能力強的菌株，此過程中篩選的原理是 木質素能與苯胺藍結合形成藍色復合物，當木質素被木質素降解菌分解后，藍色復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以木質素降解菌為中心的透明圈木質素能與苯胺藍結合形成藍色復合物，當木質素被木質素降解菌分解后，藍色復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以木質素降解菌為中心的透明圈。
（3）對初篩的木質素降解菌進一步分離純化時，還可采用平板劃線法，分區(qū)劃線時應注意不要將最后一區(qū)的劃線與 第一劃線區(qū)域相連第一劃線區(qū)域相連。接種后的平板應 倒置倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（4）若要分離培養(yǎng)液中的木質素降解酶，可采用電泳法。電泳法的原理是利用待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及 分子本身的大小、形狀的不同的不同分子本身的大小、形狀的不同的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的 遷移速率遷移速率，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。
【考點】微生物的純培養(yǎng)．
【答案】稀釋涂布平板；選擇；有無透明圈和透明圈的直徑；木質素能與苯胺藍結合形成藍色復合物，當木質素被木質素降解菌分解后，藍色復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以木質素降解菌為中心的透明圈；第一劃線區(qū)域相連；倒置；分子本身的大小、形狀的不同的不同；遷移速率
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：16引用：1難度：0.7
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