科學(xué)家從某無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因（prG），該基因能激發(fā)細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了新思想．某國家重點實驗室準(zhǔn)備探索利用基因工程生產(chǎn)單克隆抗體，請回答下列問題：
（1）實驗室已獲得無限增殖調(diào)控基因（prG）．在體外，可采用PCRPCR技術(shù)大量擴(kuò)增該目的基因．該技術(shù)的基本反應(yīng)過程：目的基因DNA受熱變性變性后解鏈為單鏈，與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合，然后在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行延伸延伸，如此重復(fù)循環(huán)多次．該技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物．
（2）該基因工程操作的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建．本研究中，受體細(xì)胞為（經(jīng)抗原刺激）B細(xì)胞（經(jīng)抗原刺激）B細(xì)胞，欲將目的基因轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞，常采用顯微注射顯微注射方法．若實驗成功，則受體細(xì)胞既能無限增殖無限增殖，又能產(chǎn)生抗體產(chǎn)生抗體．
（3）制備單克隆抗體通常選用細(xì)胞融合技術(shù)，使（經(jīng)抗原刺激）B（經(jīng)抗原刺激）B細(xì)胞與骨髓瘤骨髓瘤細(xì)胞融合，融合成功的細(xì)胞經(jīng)過篩選就是所需要的雜交瘤雜交瘤細(xì)胞．
【答案】PCR；變性；延伸；一段已知目的基因的核苷酸序列；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；（經(jīng)抗原刺激）B細(xì)胞；顯微注射；無限增殖；產(chǎn)生抗體；（經(jīng)抗原刺激）B；骨髓瘤；雜交瘤
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：29引用：3難度：0.1
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列。回答下列問題：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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