葡激酶（SAK）是由金黃色葡萄球菌分泌的一種纖溶酶原激活物，它可以激活人體中的血纖維蛋白溶酶原形成血纖維蛋白溶酶，從而溶解血栓。研究人員嘗試將SAK基因?qū)氲椒阎?，利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)有生物學(xué)活性的SAK．回答下列問題：
（1）目的基因可從基因文庫中獲取，與基因組文庫相比，cDNA文庫具有的特點(diǎn)：cDNA文庫比較小，無啟動子和內(nèi)含子，只含部分基因，物種間可進(jìn)行基因交流cDNA文庫比較小，無啟動子和內(nèi)含子，只含部分基因，物種間可進(jìn)行基因交流（答出兩點(diǎn)）。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)需要兩種引物，原因是 DNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時(shí)擴(kuò)增DNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時(shí)擴(kuò)增。
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，常使用兩種不同的限制酶分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，該過程不使用同一種限制酶的原因是 防止質(zhì)粒自身環(huán)化、保證目的基因與Ti質(zhì)粒正確連接防止質(zhì)粒自身環(huán)化、保證目的基因與Ti質(zhì)粒正確連接。
（3）含有SAK基因的表達(dá)載體構(gòu)建成功后，接下來依次完成 將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌、將含有Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞將含有Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞和 將導(dǎo)入成功的植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)將導(dǎo)入成功的植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)等步驟才能獲得轉(zhuǎn)基因植株。檢測轉(zhuǎn)基因植株中的SAK基因是否表達(dá)成功，通常采用的方法是 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】cDNA文庫比較小，無啟動子和內(nèi)含子，只含部分基因，物種間可進(jìn)行基因交流；DNA聚合酶只能從3端延伸DNA鏈，用兩種引物才能確保DNA兩條鏈同時(shí)擴(kuò)增；防止質(zhì)粒自身環(huán)化、保證目的基因與Ti質(zhì)粒正確連接；將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌；將含有Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞；將導(dǎo)入成功的植物細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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