大腸桿菌是研究DNA復(fù)制特點(diǎn)的理想材料,根據(jù)下表實(shí)驗(yàn)作答。
實(shí)驗(yàn) | 細(xì)菌 | 培養(yǎng)及取樣 | 操作(密度梯度離心和放射自顯影) | 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 |
1 | 大陸桿菌 | 含3H標(biāo)記的dTTP(胸腺嘧啶脫氧核糖核苷三磷酸)的液體培養(yǎng)基、30秒取樣 | 分離DNA,堿性條件變性(雙鏈分開) | 被3H標(biāo)記的片段,一半是1000~2000個(gè)堿基的DNA小片段,而另一半則是長很多的DNA大片段。 |
2 | 大腸桿菌 | 含3H標(biāo)記的dTTP(胸腺嘧啶脫氧核糖核苷三磷酸)的液體培養(yǎng)基,3分鐘取樣 | 同上 | 被3H標(biāo)記的片段大多數(shù)是DNA大片段。 |
3 | DNA連接酶突變型大腸桿菌 | 含3H標(biāo)記的dTTP(胸腺嘧啶脫氧核糖核苷三磷酸)的液體培養(yǎng)基,3分鐘取樣 | 同上 | 同實(shí)驗(yàn)1 |
氫
氫
鍵斷裂。在大腸桿菌體內(nèi)該過程在 解旋酶
解旋酶
作用下完成。(2)實(shí)驗(yàn)2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,一半DNA大片段具有放射性,一半DNA大片段無放射性,
不能
不能
(填“能”或“不能”)說明DNA復(fù)制方式為半保留復(fù)制。(3)實(shí)驗(yàn)1結(jié)果表明,被3H標(biāo)記的DNA片段,一半是1000~2000個(gè)堿基的小片段,另一半是大片段,說明DNA復(fù)制過程中,一條鏈的復(fù)制是連續(xù)的,另一條是
不連續(xù)
不連續(xù)
(填“連續(xù)”或“不連續(xù)”)的。(4)以上實(shí)驗(yàn)表明,大腸桿菌所形成的1000~2000個(gè)堿基的小片段子鏈需要
DNA連接酶
DNA連接酶
進(jìn)一步催化連接成新鏈。【考點(diǎn)】證明DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn).
【答案】氫;解旋酶;不能;不連續(xù);DNA連接酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/10/4 7:0:1組卷:13引用:1難度:0.5
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1.某實(shí)驗(yàn)室意外獲得一種不能自主合成核苷酸的真核突變細(xì)胞,必須從培養(yǎng)基中獲?。疄榱蓑?yàn)證DNA復(fù)制的原料到底是脫氧核苷酸還是核糖核苷酸,現(xiàn)提供如下實(shí)驗(yàn)方案請(qǐng)補(bǔ)充.
(1)原理:DNA主要分布在
材料:突變細(xì)胞,基本培養(yǎng)基,核糖核苷酸,14C-核糖核苷酸,脫氧核苷酸,14C-脫氧核苷酸,放射性探測(cè)儀.
(2)步驟:第一步:配制等量基本培養(yǎng)基,分為A組、B組.
第二步:
第三步:分別接種等量的突變細(xì)胞,相同且適宜條件培養(yǎng),一段時(shí)間后,分別選取其子代細(xì)胞檢測(cè)放射性.
第四步:A組放射性主要出現(xiàn)在細(xì)胞核,B組放射性主要出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì).
(3)實(shí)驗(yàn)分析并回答,A組和B組子代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)差異的原因:發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:42引用:1難度:0.5 -
2.科學(xué)家運(yùn)用密度梯度離心等方法研究DNA復(fù)制的機(jī)制。請(qǐng)回答下列問題:
(1)讓兩組大腸桿菌分別在15NH4Cl培養(yǎng)液和14NH4Cl培養(yǎng)液中繁殖多代,培養(yǎng)液中的氮可被大腸桿菌用于合成四種
(2)實(shí)驗(yàn)一:從含15N的大腸桿菌和含14N的大腸桿菌中分別提取親代DNA,混合后放在100℃條件下進(jìn)行熱變性處理,然后進(jìn)行密度梯度離心,再測(cè)定離心管中混合的DNA單鏈含量,結(jié)果如圖a所示。
熱變性處理導(dǎo)致DNA分子中堿基對(duì)之間的
(3)實(shí)驗(yàn)二:研究人員將含15N的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到14NH4Cl培養(yǎng)液中,繁殖一代后提取子代大腸桿菌的DNA(F1DNA),將F1DNA熱變性處理后進(jìn)行密度梯度離心,離心管中出現(xiàn)的兩個(gè)條帶對(duì)應(yīng)圖b中的兩個(gè)峰。若將未進(jìn)行熱變性處理的F1DNA進(jìn)行密度梯度離心,則離心管中只出現(xiàn)一個(gè)條帶。據(jù)此分析,F(xiàn)1DNA由
①兩條15N-DNA單鏈
②兩條14N-DNA單鏈
③兩條既含15N又含有14N的DNA單鏈
④一條15N-DNA單鏈、一條14N-DNA單鏈
⑤雙鏈的F1DNA密度梯度離心結(jié)果只有一個(gè)條帶,排除“全保留復(fù)制”
⑥單鏈的F1DNA密度梯度離心結(jié)果有兩個(gè)條帶,排除“彌散復(fù)制”
⑦圖b與圖a中兩個(gè)峰的位置相同,支持“半保留復(fù)制”發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:5引用:1難度:0.4 -
3.20世紀(jì),有科學(xué)家提出DNA分子半不連續(xù)復(fù)制假說:DNA分子復(fù)制時(shí),一條子鏈?zhǔn)沁B續(xù)形成的,另一條子鏈不連續(xù)即先形成短鏈片段(如圖1所示)后再連接成長鏈片段。為驗(yàn)證該假說,科學(xué)家岡崎進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):讓T4噬菌體在20℃時(shí)侵染大腸桿菌70min后,將3H標(biāo)記的脫氧核苷酸添加到大腸桿菌的培養(yǎng)基中,在15 s、30 s、60s、120 s時(shí),分離T4噬菌體 DNA并通過加熱使 DNA全部解旋,再進(jìn)行密度梯度離心,根據(jù) DNA 單鏈片段分布位置確定片段大小,發(fā)現(xiàn)DNA單鏈片段越小,離試管口距離越近。檢測(cè)相應(yīng)位置DNA單鏈片段的放射性強(qiáng)度,結(jié)果如圖2 所示。下列說法正確的是( )
發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:8引用:1難度:0.7
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