徑柳匙葉草是一種泌鹽植物??蒲泄ぷ髡邔搅兹~草液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi),獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片段,Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶,圖中箭頭所指為三種限制酶的切點;圖2是三種限制酶的識別序列與酶切位點示意圖;圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請分析回答問題:
(1)將徑柳匙葉草不同基因的DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中儲存,再根據(jù)TaNHX2基因的特定序列從中提取圖1所示DNA片段,該獲取目的基因的方法為從基因文庫中獲取從基因文庫中獲取。
(2)不能在徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中獲得TaNHX2基因的mRNA,其原因是基因的選擇性表達(dá)(或徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá))基因的選擇性表達(dá)(或徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá))。
(3)若用BamHⅠ切割圖1所示的DNA片段,獲得目的基因,則需選用Sau3AⅠSau3AⅠ切割圖3所示質(zhì)粒,以便構(gòu)建基因表達(dá)載體,該方案的缺陷是出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定。故切割圖1所示DNA片段的最佳方案是選用EcoRⅠ和BamHⅠEcoRⅠ和BamHⅠ酶。
(4)用上述最佳方案構(gòu)建基因表達(dá)載體,所得重組質(zhì)粒不一定能不一定能(選填“能”“不能”或“不一定能”)被BamHⅠ切割。
(5)圖3中,質(zhì)粒上的抗生素抗性基因的作用是以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。
(6)為了檢測技術(shù)成果,科研工作者在個體水平的檢測方法是將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地,觀察其生長狀況將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地,觀察其生長狀況。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】從基因文庫中獲?。换虻倪x擇性表達(dá)(或徑柳匙葉草根尖分生區(qū)細(xì)胞中TaNHX2基因不能表達(dá));Sau3AⅠ;出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化、目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定;EcoRⅠ和BamHⅠ;不一定能;以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞;將轉(zhuǎn)基因棉花種植在鹽堿地,觀察其生長狀況
【解答】
【點評】
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