甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì)，為了改善黃瓜的品質(zhì)，科學家利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將一種甜蛋白基因成功導入黃瓜細胞，得到了轉(zhuǎn)基因植株。圖1、圖2分別為甜蛋白基因編碼鏈（僅示部分堿基）和Ti質(zhì)粒的示意圖，其中①～⑤表示不同位點。請回答問題：
（1）甜蛋白基因啟動子序列和終止密碼子的編碼序列分別位于圖1的 非編碼區(qū)1非編碼區(qū)1、編碼編碼區(qū)。啟動子的功能是 啟動子可以被RNA 聚合酶識別并結合，開始轉(zhuǎn)錄合成mRNA啟動子可以被RNA 聚合酶識別并結合，開始轉(zhuǎn)錄合成mRNA。
（2）通過PCR技術大量擴增甜蛋白基因的編碼區(qū)序列，需要設計一對引物，則引物序列為 5′-TCTAGAGG-3′5′-TCTAGAGG-3′、5'-CTCGAGAT-3'5'-CTCGAGAT-3'。
（3）下表為不同限制酶的作用位點，在構建甜蛋白基因表達載體時，應選用的限制酶是 XhoⅠ和XbaⅠXhoⅠ和XbaⅠ。
| 限制酶 | 識別序列和切割位點 |
| BamHⅠ | 5′G↓GATCC3′ |
| PstⅠ | 5′C↓TGCAG3′ |
| XhoⅠ | 5′C↓TCGAG3′ |
| XbaⅠ | 5′T↓CTAGA3′ |
③
③
（填序號）處插入。T-DNA的作用是將甜蛋白基因?qū)朦S瓜細胞并
將甜蛋白基因整合到黃瓜的染色體上
將甜蛋白基因整合到黃瓜的染色體上
。（5）構建好的表達載體需先轉(zhuǎn)入
農(nóng)桿菌的T-DNA
農(nóng)桿菌的T-DNA
后再轉(zhuǎn)化黃瓜細胞，轉(zhuǎn)化后應在培養(yǎng)基中添加 潮霉素
潮霉素
，篩選轉(zhuǎn)化成功的愈傷組織。經(jīng)組織培養(yǎng)，獲得A、B兩個黃瓜品系并對其甜蛋白表達量進行測定，結果如圖3。與品系A相比，品系B的甜蛋白表達量較低，最可能的原因是 品系B的甜蛋白基因的插入位點影響了甜蛋白基因的表達
品系B的甜蛋白基因的插入位點影響了甜蛋白基因的表達
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】非編碼區(qū)1；編碼；啟動子可以被RNA 聚合酶識別并結合，開始轉(zhuǎn)錄合成mRNA；5′-TCTAGAGG-3′；5'-CTCGAGAT-3'；XhoⅠ和XbaⅠ；③；將甜蛋白基因整合到黃瓜的染色體上；農(nóng)桿菌的T-DNA；潮霉素；品系B的甜蛋白基因的插入位點影響了甜蛋白基因的表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：53引用：3難度：0.2
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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