干擾素是人體T細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴因子，對(duì)新冠病毒有效且可用于癌癥治療。下圖表示早期利用大腸桿菌生產(chǎn)人干擾素的流程（強(qiáng)啟動(dòng)子替換普通啟動(dòng)子有加強(qiáng)基因表達(dá)的作用），此過(guò)程生產(chǎn)的干擾素沒(méi)有糖鏈，但糖鏈對(duì)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性和半衰期有影響，所以后期需對(duì)干擾素進(jìn)行體外加工?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）吸入式新冠疫苗進(jìn)入人體后，刺激人體形成的

漿細(xì)胞

漿細(xì)胞

可產(chǎn)生抗體，增強(qiáng)特異性免疫過(guò)程。若要制備單克隆抗體，需要用小鼠的骨髓瘤細(xì)胞與上述細(xì)胞進(jìn)行融合。①表示通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因：首先從提取的三種RNA中針對(duì)性擴(kuò)增mRNA，已知真核生物基因的mRNA在5′端通過(guò)甲基化保護(hù)頭部，3′端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸序列）保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性擴(kuò)增mRNA堿基序列，該如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物？

用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列作引物

用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列作引物

（2）過(guò)程②表示干擾素基因與強(qiáng)啟動(dòng)子結(jié)合，用于大幅提升目的基因的表達(dá)水平。已知核酸酶分為核酸內(nèi)切酶及核酸外切酶兩種，核酸外切酶具有外切性特點(diǎn)，一般從多核苷酸鏈的末端水解核酸。干擾素基因與強(qiáng)啟動(dòng)子重組前后需要在兩端添加特殊酶切位點(diǎn)，通常需要從酶切位點(diǎn)向端部再補(bǔ)加幾個(gè)脫氧核苷酸，否則限制酶不能切割或效率很低，推測(cè)這是由限制酶的

從核酸分子內(nèi)部切割（內(nèi)切性）

從核酸分子內(nèi)部切割（內(nèi)切性）

特點(diǎn)決定的。
（3）過(guò)程③形成的重組質(zhì)?？赡転榉聪蜻B接，可利用過(guò)程④PCR技術(shù)進(jìn)行鑒別。如題圖所示，分析已知堿基序列后，設(shè)計(jì)一對(duì)引物b和c（或者引物a和d）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果是

有DNA擴(kuò)增產(chǎn)物（有克隆分子）

有DNA擴(kuò)增產(chǎn)物（有克隆分子）

，則為正向連接，反之則為反向連接。
（4）大腸桿菌不能生成糖基化的干擾素，原因是

大腸桿菌沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體

大腸桿菌沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體

。
（5）生產(chǎn)干擾素的檢測(cè)除核酸分子檢測(cè)和蛋白質(zhì)分子檢測(cè)外，還需要進(jìn)行

干擾素活性檢測(cè)

干擾素活性檢測(cè)

。