下表是幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖 1、圖 2 中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn),其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
識(shí)別序 列及切割位點(diǎn) |
BclⅠ和HindⅢ
BclⅠ和HindⅢ
這 2 種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過(guò) DNA連接
DNA連接
酶作用后獲得重組質(zhì)粒。(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加
四環(huán)素
四環(huán)素
,平板上長(zhǎng)出的菌落,常用PCR 鑒定,所用的引物組成為圖 2 中的 引物甲
引物甲
和 引物丙
引物丙
。(3)若 BamHⅠ酶切的DNA 末端與 BclⅠ酶切的DNA 末端連接,連接部位的 6 個(gè)堿基對(duì)序列為
(或)
(或)
,對(duì)于該部位,這兩種酶 都不能
都不能
(填“都能”“都不能”或“只有一種能”) 切開(kāi)。(4)若用 Sau3AⅠ切割圖 1 質(zhì)粒,最多可獲得
7
7
種大小不同的DNA 片段。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】BclⅠ和HindⅢ;DNA連接;四環(huán)素;引物甲;引物丙;(或);都不能;7
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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