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肺炎克雷伯氏菌是獲得性肺炎主要的致病菌??咕幬锏牟缓侠硎褂茫瑢?dǎo)致肺炎克雷伯氏菌耐藥株增多、耐藥性增強(qiáng)。噬菌體是一類細(xì)菌性病毒,被認(rèn)為是最具前景的抗生素替代品。為研究探索應(yīng)用裂解性噬菌體防治多重耐藥肺炎克雷伯氏菌引起的小鼠肺炎,研究人員進(jìn)行了以下實驗。
(1)噬菌體體外抑菌實驗
材料與用具:LB培養(yǎng)基,肺炎克雷伯氏菌懸液,感染復(fù)數(shù)(MOI)分別為10、1、0.1的噬菌體phage1513,PBS(磷酸鹽平衡生理鹽水),恒溫振蕩培養(yǎng)箱,比色計。
(要求與說明:感染復(fù)數(shù)指侵染時噬菌體與細(xì)菌個數(shù)之比,感染復(fù)數(shù)越高,裂解越快。肺炎克雷伯氏菌數(shù)量每小時測一次,可通過測定波長650nm的光密度值并計算,具體方法不作要求)
完善實驗思路:
①取4個反應(yīng)器皿,加入等量LB
液體
液體
(液體/固體)培養(yǎng)基。
②分組如下:
A組:3mL肺炎克雷伯氏菌懸液+3mLPBS
B組:3mL菌液+3mL感染復(fù)數(shù)為10的噬菌體phage1513
C組:3mL菌液+3mL感染復(fù)數(shù)為1的噬菌體phage1513
D組:3mL菌液+3mL感染復(fù)數(shù)為0.1的噬菌體phage1513
③置于恒溫振蕩培養(yǎng)箱37℃、150rpm培養(yǎng),
用比色計每隔1h測定650nm處光密度值
用比色計每隔1h測定650nm處光密度值
。
④統(tǒng)計分析數(shù)據(jù),并在坐標(biāo)圖上畫出預(yù)測結(jié)果:
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(2)噬菌體體內(nèi)治療實驗
采用腹腔注射的方式對小鼠進(jìn)行麻醉,滴鼻20μL肺炎克雷伯氏菌懸液,建立肺炎小鼠模型。滴鼻菌液后2h,3個實驗組以滴鼻給藥方式分別給予小鼠20μL感染復(fù)數(shù)為10、1、0.1的噬菌體,對照組滴鼻給予小鼠20μL的PBS緩沖液。自滴鼻菌液開始,每12h記錄死亡小鼠數(shù)量。實驗結(jié)果如圖:
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據(jù)圖可得到的結(jié)論有:①
噬菌體在體內(nèi)可以有效地治療肺炎克雷伯氏菌引起的小鼠肺炎
噬菌體在體內(nèi)可以有效地治療肺炎克雷伯氏菌引起的小鼠肺炎
;②
感染復(fù)數(shù)越高,噬菌體對小鼠肺炎感染的保護(hù)作用越強(qiáng)
感染復(fù)數(shù)越高,噬菌體對小鼠肺炎感染的保護(hù)作用越強(qiáng)
。
(3)分析與討論
①從變異的角度分析,肺炎克雷伯氏菌出現(xiàn)耐藥性的原因是
基因突變
基因突變

②噬菌體能夠在血液及其他組織中循環(huán),但也會被抗體中和,影響其裂解效果。在急性感染治療早期,抗體中和作用并不能成為治療的障礙,原因是
噬菌體活動要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于抗體的產(chǎn)生(產(chǎn)生抗體需要一段時間)
噬菌體活動要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于抗體的產(chǎn)生(產(chǎn)生抗體需要一段時間)
。如果噬菌體中和抗體能夠在整個噬菌體治療過程中一直出現(xiàn),可通過
重復(fù)給藥噬菌體(加大噬菌體給藥劑量)
重復(fù)給藥噬菌體(加大噬菌體給藥劑量)
達(dá)到治療效果。

【答案】液體;用比色計每隔1h測定650nm處光密度值;噬菌體在體內(nèi)可以有效地治療肺炎克雷伯氏菌引起的小鼠肺炎;感染復(fù)數(shù)越高,噬菌體對小鼠肺炎感染的保護(hù)作用越強(qiáng);基因突變;噬菌體活動要遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于抗體的產(chǎn)生(產(chǎn)生抗體需要一段時間);重復(fù)給藥噬菌體(加大噬菌體給藥劑量)
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:5引用:1難度:0.7
相似題
  • 1.噬菌體侵染細(xì)菌的實驗中,對噬菌體蛋白質(zhì)合成的正確敘述是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/1 8:0:2組卷:4引用:1難度:0.9
  • 2.如圖是著名的噬菌體侵染細(xì)菌的實驗和肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗的部分步驟:
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    (1)赫爾希和蔡斯采用的實驗方法是
     
    ,該實驗?zāi)芊裼?SUP>15N來標(biāo)記,為什么?
     

    (2)若要大量制備32P標(biāo)記的噬菌體,需先用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)
     
    ,再用噬菌體去感染它.T2噬菌體DNA復(fù)制的場所是
     

    (3)從圖中所示結(jié)果分析,該實驗標(biāo)記的是
     
    (DNA還是蛋白質(zhì)),當(dāng)接種噬菌體后培養(yǎng)時間過長,會發(fā)現(xiàn)上清液中的放射性升高,最可能的原因是復(fù)制增殖后的噬菌體
     

    (4)如圖的“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗”得出的結(jié)論是
     
    .加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是
     

    發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:13引用:1難度:0.5
  • 3.圖1為某同學(xué)重復(fù)了探究生物遺傳物質(zhì)的“T2噬菌體侵染大腸桿菌實驗”(甲、乙)和圖2“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗”.
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    據(jù)圖回答下列問題:
    (1)圖甲中T2噬菌體DNA復(fù)制的場所是
     

    (2)圖乙中若用含32P的噬菌體侵染大腸桿菌,經(jīng)過離心,上清液也有很低的放射性,原因可能是
     
    .若改用14C、3H、15N等標(biāo)記噬菌體而細(xì)菌未標(biāo)記,在子代噬菌體中,
     
    中能找到標(biāo)記元素.
    (3)研究發(fā)現(xiàn)T2噬菌體屬于噬菌體中的一類,除此之外還有λ噬菌體等,λ噬菌體的性質(zhì)較“溫和”感染細(xì)菌后并不使細(xì)菌死亡而是將自身的DNA插入進(jìn)細(xì)菌的DNA,隨細(xì)菌DNA一起復(fù)制,所以常用于基因工程中做為
     
    (工具).假定原宿主細(xì)胞中某一DNA片段含有3000個堿基對,其中G+C占堿基總數(shù)的30%,插入后的DNA整段轉(zhuǎn)錄形成的mRNA含有4000個堿基,其中A和U占60%,則插入進(jìn)來的噬菌體DNA片段中A+T占該插入片段堿基總數(shù)的比例為
     

    (4)圖2的“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗”得出的結(jié)論是
     
    .加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是
     

    發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:91引用:1難度:0.3
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