普通棉花中含β甘露糖苷酶基因（GhMmaA2），能在纖維細胞中特異性表達，產(chǎn)生的β甘露糖苷酶催化半纖維素降解．棉纖維長度變短?？蒲腥藛T通過構建反義GhMnaA2基因表達載體，利用農(nóng)桿菌轉化法導入棉花細胞，成功獲得轉基因棉花品種，具體過程如圖：
（1）基因表達載體除圖示組成外，還有復制原點、終止子、標記基因終止子、標記基因等（答兩個）。①②過程中所用的限制酶分別是 HindⅢ和BamHⅠHindⅢ和BamHⅠ和 SmaⅠSmaⅠ。
（2）PCR技術擴增β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）原理是 DNA復制DNA復制，該過程需要根據(jù)GhMnaA2基因設計 22種引物，為保證 GhMnaA2插入到質(zhì)粒2中，需在引物的 5′5′端添加限制酶識別序列。
（3）③過程中用酶切法可鑒定正、反義基因表達載體。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切割正義基因表達載體獲得0.1kb、3.75kb、5.25kb、8.6kb四種長度的DNA片段，則用NotⅠ酶切反義基因表達載體獲得DNA片段的長度應是 5.35kb5.35kb和 12.35kb12.35kb。
（4）導入細胞內(nèi)的反義GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纖維更長的原理是 由于反義GhMnaA2轉錄的mRNA能與棉花細胞內(nèi)的GhMnaA2轉錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達（翻譯），故導入細胞內(nèi)的反義GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纖維更長由于反義GhMnaA2轉錄的mRNA能與棉花細胞內(nèi)的GhMnaA2轉錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達（翻譯），故導入細胞內(nèi)的反義GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纖維更長。
（5）為什么不能用GhMnaA2探針進行DNA分子雜交來鑒定基因表達載體是否導入棉花細胞？因為棉花細胞中本來就有GhMna2，不管是否導入都能與該探針發(fā)生堿基互補配對，故不能用GhMnaA2探針進行DNA分子雜交來鑒定基因表達載體是否導入棉花細胞因為棉花細胞中本來就有GhMna2，不管是否導入都能與該探針發(fā)生堿基互補配對，故不能用GhMnaA2探針進行DNA分子雜交來鑒定基因表達載體是否導入棉花細胞
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】終止子、標記基因；HindⅢ和BamHⅠ；SmaⅠ；DNA復制；2；5′；5.35kb；12.35kb；由于反義GhMnaA2轉錄的mRNA能與棉花細胞內(nèi)的GhMnaA2轉錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達（翻譯），故導入細胞內(nèi)的反義GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纖維更長；因為棉花細胞中本來就有GhMna2，不管是否導入都能與該探針發(fā)生堿基互補配對，故不能用GhMnaA2探針進行DNA分子雜交來鑒定基因表達載體是否導入棉花細胞
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：66引用：1難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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