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我國有大面積的沿海灘涂和鹽堿地,利用生物技術(shù)培育出耐鹽農(nóng)作物??梢院侠砝眠@些沿海灘涂和鹽堿地,以此增大我國的人均可用耕地面積。如圖表示構(gòu)建基因表達(dá)載體所用到的外源DNA和質(zhì)粒,其中箭頭指向是限制酶識(shí)別的核苷酸序列所在位置。另外,BamHⅠ,SmaⅠ和HindⅢ三種限制酶切割DNA時(shí)形成的末端均不同。請回答下列問題。

(1)可以從耐鹽菌的基因文庫中獲得耐鹽基因?;蛭膸彀?
基因組文庫和cDNA文庫
基因組文庫和cDNA文庫
。獲得的耐鹽基因在細(xì)胞外進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),常采用的技術(shù)是
PCR技術(shù)
PCR技術(shù)
。該技術(shù)用到的酶與普通的胞內(nèi)酶相比,最大的特點(diǎn)是
耐高溫
耐高溫
。
(2)構(gòu)建該重組質(zhì)粒時(shí),不能使用限制酶SmaⅠ進(jìn)行酶切,理由是
SmaⅠ會(huì)破壞耐鹽基因,切割外源DNA時(shí)只能用到BamH1和HindⅢ,這兩種酶切割外源DNA形成的末端與SmaI切割質(zhì)粒形成的末端不同,無法進(jìn)行拼接
SmaⅠ會(huì)破壞耐鹽基因,切割外源DNA時(shí)只能用到BamH1和HindⅢ,這兩種酶切割外源DNA形成的末端與SmaI切割質(zhì)粒形成的末端不同,無法進(jìn)行拼接

(3)就一個(gè)完整的基因表達(dá)載體而言,圖中未標(biāo)出的特殊DNA序列是
終止子
終止子
啟動(dòng)子
啟動(dòng)子
,其中后者具有
RNA聚合
RNA聚合
酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。
(4)設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn),從細(xì)胞水平上鑒定受體細(xì)胞內(nèi)是否成功導(dǎo)入該重組質(zhì)粒。請寫出簡要實(shí)驗(yàn)思路:
將進(jìn)行轉(zhuǎn)化處理的受體細(xì)胞置于分別含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上,檢測受體細(xì)胞是否存活
將進(jìn)行轉(zhuǎn)化處理的受體細(xì)胞置于分別含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上,檢測受體細(xì)胞是否存活
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】基因組文庫和cDNA文庫;PCR技術(shù);耐高溫;SmaⅠ會(huì)破壞耐鹽基因,切割外源DNA時(shí)只能用到BamH1和HindⅢ,這兩種酶切割外源DNA形成的末端與SmaI切割質(zhì)粒形成的末端不同,無法進(jìn)行拼接;終止子;啟動(dòng)子;RNA聚合;將進(jìn)行轉(zhuǎn)化處理的受體細(xì)胞置于分別含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上,檢測受體細(xì)胞是否存活
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:5引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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