硝基苯酚是工業(yè)污水中重要污染物，某研究小組欲從污水處理廠污泥中分離分解硝基苯酚的細菌。請回答下列有關(guān)問題：
（1）為了篩選污泥中可分解硝基苯酚的細菌，所用的選擇培養(yǎng)基只能以

硝基苯酚

硝基苯酚

作為唯一碳源。配制培養(yǎng)基時除需提供碳源、氮源、水和無機鹽外，還需要滿足微生物生長對特殊營養(yǎng)物質(zhì)、

pH以及氧氣

pH以及氧氣

的要求。
（2）純化菌株時，可采用平板劃線法進行接種。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有

①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始

①接種環(huán)灼燒后未冷卻；②劃線未從第一區(qū)域末端開始

。（答出兩點原因）
（3）若接種過程和培養(yǎng)過程均符合要求，結(jié)果卻在培養(yǎng)基上觀察到了不同形態(tài)的菌落（不考慮分解硝基苯酚的細菌存在多種變異類型），則產(chǎn)生這種現(xiàn)象的可能原因是：

培養(yǎng)基的配制不符合要求（培養(yǎng)基中還含有其他有機碳源）

培養(yǎng)基的配制不符合要求（培養(yǎng)基中還含有其他有機碳源）

；若培養(yǎng)基的配制、接種及培養(yǎng)等過程的操作均規(guī)范無誤，則這些細菌所利用的碳源可能是

空氣中的CO₂

空氣中的CO₂

，其代謝類型（同化作用）是

自養(yǎng)型

自養(yǎng)型

。
（4）若要對分解硝基苯酚的細菌菌落進行計數(shù)，接種時，應(yīng)采用的方法是

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測樣品中大約含有的活菌數(shù)，原因是

樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌

樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌

。進行菌落數(shù)量統(tǒng)計時，要選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止

因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目

因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目

。