長春新堿是一種由夾竹桃長春花屬植物長春花中提取的一種生物堿,是目前常用的天然抗腫瘤藥物之一。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得長春新堿的基本過程如圖所示。請回答下列問題:
外植體①愈傷組織②液體培養(yǎng)基中懸浮振蕩培養(yǎng)③細胞懸浮培養(yǎng)與繼代④提取、檢測
(1)①表示 脫分化脫分化,形成的愈傷組織細胞特點是 無組織結(jié)構(gòu),松散的薄壁細胞團無組織結(jié)構(gòu),松散的薄壁細胞團。該植物組織培養(yǎng)過程屬于 CC(A.器官發(fā)生途徑B.體細胞胚發(fā)生途徑C.都不是)。
(2)愈傷組織在液體培養(yǎng)基中懸浮振蕩培養(yǎng)的目的是 將愈傷組織分散成單細胞懸液,使細胞充分利用營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣將愈傷組織分散成單細胞懸液,使細胞充分利用營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣。由于懸浮細胞在液體培養(yǎng)基中生長迅速,容易造成pH下降,可用 及時更換新鮮培養(yǎng)基及時更換新鮮培養(yǎng)基或 培養(yǎng)基中添加pH緩沖劑培養(yǎng)基中添加pH緩沖劑方法保持培養(yǎng)基適宜pH值。
(3)如要將外源基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入長春花細胞進行遺傳改造,研究人員用長春花的愈傷組織作為外植體和經(jīng)篩選的農(nóng)桿菌進行共培養(yǎng),共培養(yǎng)的目的是 使T-DNA攜帶目的基因整合到植物細胞染色體DNA上使T-DNA攜帶目的基因整合到植物細胞染色體DNA上,共培養(yǎng)后將外植體在含有抗生素的培養(yǎng)基中進行繼代培養(yǎng)以篩選發(fā)生 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化的細胞,此過程選用的抗生素在農(nóng)桿菌中 有有(“有”或“無”)相應(yīng)的抗性基因。
(4)研究人員提取不同組織細胞的mRNA,再將其逆轉(zhuǎn)錄成cDNA進行PCR擴增,其目的是 鑒定目的基因在不同細胞中表達情況鑒定目的基因在不同細胞中表達情況,該過程需要 逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶參與。設(shè)計引物是PCR技術(shù)成功的關(guān)鍵步驟之一。如圖為某同學(xué)設(shè)計的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列),請判斷是否合理并說明理由。
①第1組:不合理,引物I和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補配對而失效不合理,引物I和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補配對而失效;
②第2組:不合理,引物I自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效不合理,引物I自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效。
①
②
③
④
【答案】脫分化;無組織結(jié)構(gòu),松散的薄壁細胞團;C;將愈傷組織分散成單細胞懸液,使細胞充分利用營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣;及時更換新鮮培養(yǎng)基;培養(yǎng)基中添加pH緩沖劑;使T-DNA攜帶目的基因整合到植物細胞染色體DNA上;轉(zhuǎn)化;有;鑒定目的基因在不同細胞中表達情況;逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合;不合理,引物I和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補配對而失效;不合理,引物I自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/12 8:0:9組卷:22引用:2難度:0.5
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發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:39引用:10難度:0.5
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