如圖表示某種綠色熒光蛋白基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，綠色熒光蛋白基因有820個(gè)堿基對(duì)（bp），質(zhì)粒有5369個(gè)堿基對(duì)（bp）。請(qǐng)據(jù)圖回答問題：
（1）上述基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程需要的基本工具包括：限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體。過程①②用相同的兩種限制酶切割，與單一酶切相比的優(yōu)勢(shì)有 可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運(yùn)載體中可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運(yùn)載體中。
（2）過程②目的基因的擴(kuò)增可通過PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)，進(jìn)行PCR時(shí)除提供DNA母鏈，4種脫氧核苷酸，還需 Taq酶和人工合成的引物Taq酶和人工合成的引物等基本條件（至少填兩個(gè)）。PCR可成指數(shù)形式擴(kuò)增目的基因，每個(gè)循環(huán)一般可分為 變性、退火、延伸變性、退火、延伸。
（3）已知圖中質(zhì)粒經(jīng)BamHⅠ、HindⅢ雙酶切后進(jìn)行電泳，若出現(xiàn)了一條長(zhǎng)度為5150bp的DNA條帶，則重組質(zhì)粒的長(zhǎng)度為 59705970的DNA片段條帶。
（4）若想獲得發(fā)綠色熒光的小鼠，可將重組質(zhì)粒用 顯微注射顯微注射法導(dǎo)入小鼠的 受精卵受精卵（細(xì)胞）中。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體；可以避免目的基因自身環(huán)化、使目的基因定向插入到運(yùn)載體中；Taq酶和人工合成的引物；變性、退火、延伸；5970；顯微注射；受精卵
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/10/1 1:0:2組卷：9引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7