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菁優(yōu)網(wǎng)IKK激酶參與動物體內(nèi)免疫細胞的分化。臨床上發(fā)現(xiàn)某重癥聯(lián)合免疫缺陷(SCID)患兒IKK基因編碼區(qū)第1183位堿基T突變?yōu)镃,導(dǎo)致IKK上第395位酪氨酸被組氨酸代替。為研究該患兒發(fā)病機制,研究人員利用純合野生鼠應(yīng)用大引物PCR定點誘變技術(shù)培育出SCID模型小鼠(純合),主要過程如圖甲、乙。分析回答下列問題:
(1)在PCR反應(yīng)體系中,除需加入引物、IKK基因、緩沖液、Mg2+等外,還需加入
Taq酶(耐高溫DNA聚合酶/熱穩(wěn)定DNA聚合酶)、4種脫氧核苷酸(或dNTP)
Taq酶(耐高溫DNA聚合酶/熱穩(wěn)定DNA聚合酶)、4種脫氧核苷酸(或dNTP)
等。
(2)在圖甲獲取突變基因過程中,需要以下3種引物:
引物A 5'-CCCAACCGGAAAGTGTCA-3'

(下劃線字母為突變堿基)
引物B 5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'
(下劃線部分為限制酶HindⅢ識別序列)
引物C 5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'
(下劃線部分為限制酶SacⅠ識別序列)
則PCR1中使用的引物有
引物A和引物B
引物A和引物B
,PCR2中使用的引物有
引物C
引物C
和圖中大引物的
(填“①”或“②”)鏈。
(3)PCR的反應(yīng)程序:94℃3min;94℃30s,58℃30s,72℃50s,30個循環(huán)。在循環(huán)之前的94℃3min處理為預(yù)變性;循環(huán)中72℃處理的目的是
使4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶作用下,合成新的DNA鏈
使4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶作用下,合成新的DNA鏈
。
(4)研究人員經(jīng)鑒定、篩選獲得一只轉(zhuǎn)基因雜合鼠F0,并確認突變基因已經(jīng)穩(wěn)定同源替代IKK基因,請你設(shè)計完成獲得SCID模型鼠的實驗步驟:
①雜交親本:
F0與野生鼠
F0與野生鼠
,雜交得F1;
②F1雌、雄鼠隨機交配得F2
③提取F2每只小鼠的基因組DNA,采用分子生物學(xué)方法,利用IKK基因探針和突變基因探針進行篩選,則
IKK基因探針檢測未出現(xiàn)雜交帶,突變基因探針檢測出現(xiàn)雜交帶
IKK基因探針檢測未出現(xiàn)雜交帶,突變基因探針檢測出現(xiàn)雜交帶
的為模型鼠。

【答案】Taq酶(耐高溫DNA聚合酶/熱穩(wěn)定DNA聚合酶)、4種脫氧核苷酸(或dNTP);引物A和引物B;引物C;②;使4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶作用下,合成新的DNA鏈;F0與野生鼠;IKK基因探針檢測未出現(xiàn)雜交帶,突變基因探針檢測出現(xiàn)雜交帶
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/11 8:0:9組卷:7引用:2難度:0.4
相似題
  • 1.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力,利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題:
    (1)PCR定點突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)。可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達載體,常用
     
    將基因表達載體導(dǎo)入植物細胞,還需用到植物細胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴增,若將一個目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個引物。
    (3)目的基因進入受體細胞內(nèi),并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為
     
    ??蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     
    。
    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?,?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是
     
    。
    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
    C.人的生長激素基因能在小鼠細胞表達,說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
    D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植(克?。?,可以獲得多個具有外源基因的后代

    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
  • 2.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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