長期高血糖可引發(fā)血管細胞衰老?？蒲腥藛T為研究S蛋白在因高血糖引發(fā)的血管細胞衰老中的作用，以腺病毒為載體將編碼S蛋白的S基因?qū)胙芗毎?，實現(xiàn)S蛋白在血管細胞中的大量表達。
（1）腺病毒的遺傳物質(zhì)為DNA，其復(fù)制需要E1、E2、E3基因共同完成。為將S基因?qū)胂俨《荆蒲腥藛T首先構(gòu)建了含S基因的重組質(zhì)粒，如圖1所示。在構(gòu)建含S基因的重組質(zhì)粒時，通過設(shè)計S基因特異的引物進行PCR設(shè)計S基因特異的引物進行PCR的方法可鑒定重組質(zhì)粒是否插入了S基因。將圖1中含S基因的重組質(zhì)粒用PacⅠPacⅠ酶切割后，獲得改造后的腺病毒DNA；將其導(dǎo)入A細胞（A細胞含有E3基因，可表達E3蛋白），如圖2所示。腺病毒DNA在A細胞內(nèi)能夠復(fù)制并指導(dǎo)腺病毒外殼蛋白的合成復(fù)制并指導(dǎo)腺病毒外殼蛋白的合成，從而產(chǎn)生大量重組腺病毒，腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上。
（2）綜合上述信息，從生物安全性角度分析重組腺病毒載體的優(yōu)點：重組腺病毒只能在A細胞中復(fù)制，即使侵染其他細胞，也不能復(fù)制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基重組腺病毒只能在A細胞中復(fù)制，即使侵染其他細胞，也不能復(fù)制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基（寫出2點）。
（3）用含S基因的重組腺病毒分別感染正常人及糖尿病患者的血管細胞，使S蛋白在血管細胞中大量表達。對正常人、糖尿病患者及二者轉(zhuǎn)入S基因后血管細胞中能促進細胞衰老的I蛋白進行檢測，結(jié)果如圖3所示（顏色越深代表表達量越高）?？捎?!--BA-->抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法檢測I蛋白的表達量：實驗結(jié)果顯示糖尿病患者糖尿病患者血管細胞中I蛋白表達量最高，推測S蛋白對高血糖引發(fā)的血管細胞衰老的作用及機制是S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量，抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量，抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】設(shè)計S基因特異的引物進行PCR；PacⅠ；復(fù)制并指導(dǎo)腺病毒外殼蛋白的合成；重組腺病毒只能在A細胞中復(fù)制，即使侵染其他細胞，也不能復(fù)制；重組腺病毒進入宿主細胞后不整合到宿主細胞染色體上；腺病毒是人工改造的載體，不含致病基；抗原-抗體雜交；糖尿病患者；S蛋白通過降低Ⅰ蛋白的含量，抑制高血糖引發(fā)的血管細胞衰老
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：33引用：5難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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