血凝素基因（HA）編碼的血凝素是構(gòu)成流感病毒囊膜纖突的主要成分。成熟的血凝素包含HA1和HA2兩個亞單位，其中HA1含有病毒與受體相互作用的位點(diǎn)。IgGFc基因片段（長度為717bp）編碼人IgG抗體中的一段小肽，常作為融合蛋白標(biāo)簽。蛋白質(zhì)分泌依賴于信號肽的引導(dǎo)，本研究中用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽，科研人員嘗試構(gòu)建IL-2SS/HA1/IgGFc融合蛋白表達(dá)載體，并導(dǎo)入大腸桿菌表達(dá)和分泌，請回答：
（1）流感病毒囊膜主要由 蛋白質(zhì)和磷脂蛋白質(zhì)和磷脂組成，囊膜上血凝素的合成場所在 宿主細(xì)胞的核糖體宿主細(xì)胞的核糖體。
（2）本實驗用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽有利于 融合蛋白表達(dá)并避免自身產(chǎn)生的融合蛋白與自身受體結(jié)合融合蛋白表達(dá)并避免自身產(chǎn)生的融合蛋白與自身受體結(jié)合，PCR擴(kuò)增目的基因時應(yīng)該選擇圖中引物 bb。
（3）設(shè)計引物時，不能包含基因HA1的終止密碼子的編碼序列，原因是 若設(shè)計引物是含有HA1的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導(dǎo)致IgGFc基因不能正常表達(dá)若設(shè)計引物是含有HA1的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導(dǎo)致IgGFc基因不能正常表達(dá)。引物序列的長度及 CG含量CG含量直接影響著PCR過程中退火溫度的設(shè)定。
（4）應(yīng)選擇限制酶 EcoRVEcoRV來切割質(zhì)粒A，然后直接將PCR產(chǎn)物與質(zhì)粒A混合，同時加入 DNA連接DNA連接酶，使得目的基因與質(zhì)粒A相連。若目的基因與質(zhì)粒A正向連接，用BamHⅠ和SacⅠ同時切割重組質(zhì)粒，完全酶切后的產(chǎn)物的長度約為 717717bp。
（5）融合蛋白中的標(biāo)簽蛋白有利于目的蛋白的分離和純化，基因工程生產(chǎn)HA1作為疫苗時，選擇人IgGFc作為標(biāo)簽的優(yōu)點(diǎn)還有 人體自身即可產(chǎn)生IgG抗體，避免了制作單克隆抗體的復(fù)雜過程人體自身即可產(chǎn)生IgG抗體，避免了制作單克隆抗體的復(fù)雜過程。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】蛋白質(zhì)和磷脂；宿主細(xì)胞的核糖體；融合蛋白表達(dá)并避免自身產(chǎn)生的融合蛋白與自身受體結(jié)合；b；若設(shè)計引物是含有HA1的終止密碼子，則核糖體讀到終止密碼子時就停止翻譯，導(dǎo)致IgGFc基因不能正常表達(dá)；CG含量；EcoRV；DNA連接；717；人體自身即可產(chǎn)生IgG抗體，避免了制作單克隆抗體的復(fù)雜過程
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：53引用：6難度：0.9
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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