科研人員擬用同源重組的方法敲除金黃色葡萄球菌的SigB基因?；卮鹣铝袉栴}：
（1）同源重組的原理如圖1所示。圖中剪刀代表的是一種核酸內(nèi)切酶。當(dāng)DNA被切開后，細(xì)胞中具有修復(fù)功能的酶可將這些切開DNA片段進(jìn)行重新連接，這樣SigB基因就能被其它堿基序列替換，實現(xiàn)SigB基因的敲除。結(jié)合圖1的信息，為實現(xiàn)基因的敲除，供體DNA片段的堿基序列應(yīng)為

中間一段與待敲除基因不同的DNA序列、且其兩側(cè)為待敲除基因兩側(cè)的同源序列

中間一段與待敲除基因不同的DNA序列、且其兩側(cè)為待敲除基因兩側(cè)的同源序列

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（2）科研人員設(shè)計了供體DNA片段，作為目的片段構(gòu)建重組質(zhì)粒，導(dǎo)入金黃色葡萄球菌中，敲除金黃色葡萄球菌的SigB基因。
①實驗中可替換SigB基因的片段是卡那霉素抗性基因，卡那霉素抗性基因的作用是

中間一段與待敲除基因不同的DNA序列、且其兩側(cè)為待敲除基因兩側(cè)的同源序列

中間一段與待敲除基因不同的DNA序列、且其兩側(cè)為待敲除基因兩側(cè)的同源序列

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②科研人員需將SigB基因上游、卡那霉素抗性基因、SigB基因下游利用

PCR

PCR

擴(kuò)增技術(shù)實現(xiàn)供體DNA片段的構(gòu)建。構(gòu)建過程如圖2所示。
由圖2可知，SigB基因上游和卡那霉素抗性基因變性后再復(fù)性，SiB基因上游和卡那霉素抗性基因單鏈能夠通過

堿基互補(bǔ)配對

堿基互補(bǔ)配對

原則形成局部雙鏈結(jié)構(gòu)，然后在

耐高溫的DNA聚合酶

耐高溫的DNA聚合酶

催化作用下形成SigB基因上游和卡那霉素抗性基因融合片段。按照此操作，可將SigB基因上游和卡那霉素抗性基因融合片段與SigB基因下游融合構(gòu)建出供體DNA片段。
③通過設(shè)計引物可以使卡那霉素抗性基因擴(kuò)增后，兩側(cè)應(yīng)含有與SigB基因上、下游相同的堿基序列。從圖3的p1～p4中選取的引物組合是

p2和p3

p2和p3

，該引物組合要如何改造才能使其兩側(cè)含有與SigB基因上、下游相同的堿基序列

在p2的5'端加上與SigB基因下游5'端（或左側(cè)）相同的序列，在p3的3'端加上與SigB基因上游3'端（或右側(cè)）相同的序列

在p2的5'端加上與SigB基因下游5'端（或左側(cè)）相同的序列，在p3的3'端加上與SigB基因上游3'端（或右側(cè)）相同的序列

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（3）有人提出：“可以用這個方法，將人受精卵中新冠病毒受體基因進(jìn)行敲除，使得不受病毒感染?！蹦闶欠裢膺@種觀點，從安全和倫理的角度分別寫出理由

不同意
安全：①外源DNA分子進(jìn)入受精卵后可能引起一些還沒有發(fā)現(xiàn)的弊端，影響生命健康；②基因敲除后會導(dǎo)致人類基因庫發(fā)生變化，在進(jìn)化中可能存在一些潛在的風(fēng)險。
倫理：改造、定制人的受精卵違背倫理道德。

不同意
安全：①外源DNA分子進(jìn)入受精卵后可能引起一些還沒有發(fā)現(xiàn)的弊端，影響生命健康；②基因敲除后會導(dǎo)致人類基因庫發(fā)生變化，在進(jìn)化中可能存在一些潛在的風(fēng)險。
倫理：改造、定制人的受精卵違背倫理道德。

（分別答出一點即可）。