研究者取野生型小鼠(Ⅰ+Ⅰ+)的胚胎干細胞,轉(zhuǎn)入含neor基因(新霉素抗性基因)的DNA片段,定向突變Ⅰ+基因(結(jié)果如圖1),再將突變的胚胎干細胞移回野生型小鼠胚胎,培育出帶突變基因(Ⅰ-)的雜合子小鼠.
(1)將外源DNA片段導(dǎo)入胚胎干細胞后,需用含 新霉素新霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,以篩選得到突變的胚胎干細胞.
(2)用此雜合體小鼠與野生型小鼠進行雜交實驗,并通過DNA分子雜交技術(shù)檢測小鼠的基因型,結(jié)果如圖2.
①檢測小鼠的基因型,需根據(jù) 外顯子2和neor基因外顯子2和neor基因序列設(shè)計DNA分子探針.根據(jù)雜交實驗結(jié)果推測,I基因的功能是與 生長發(fā)育生長發(fā)育有關(guān).
②分析系譜圖 不能不能(能/不能)判斷Ⅰ+、Ⅰ-基因的顯、隱性,理由是 雜合子小鼠既有體型正常的,又有發(fā)育遲緩、體型瘦弱的,無法判斷性狀的顯、隱性,所以也無法判斷Ⅰ+、Ⅰ-基因的顯、隱性雜合子小鼠既有體型正常的,又有發(fā)育遲緩、體型瘦弱的,無法判斷性狀的顯、隱性,所以也無法判斷Ⅰ+、Ⅰ-基因的顯、隱性.
③只有突變基因來自 父本父本(父本/母本)時,雜合子小鼠才表現(xiàn)出發(fā)育遲緩,由此推測來自 母本母本的I基因在體細胞中不表達.
④提取小鼠體細胞的總RNA,加入Actin基因(編碼細胞骨架蛋白)和neor基因的RNA探針,之后加入RNA酶水解單鏈RNA.若探針能與細胞樣品的RNA結(jié)合成雙鏈RNA則不被酶水解而保留,電泳分析時呈現(xiàn)明顯條帶(在記錄實驗結(jié)果時,有明顯條帶用“+”表示,無明顯條帶用“一”表示).請將支持③推測的實驗結(jié)果填入表中ⅰ、ⅱ、ⅲ處.
野生型小鼠 | 突變基因來自父本的雜合子小鼠 | 突變基因來自母本的雜合子小鼠 | |
Actin基因的RNA探針 | + | + | + |
neor基因的RNA探針 | ⅰ - - |
ⅱ + + |
ⅲ - - |
野生型:發(fā)育遲緩型=1:1
野生型:發(fā)育遲緩型=1:1
.【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】新霉素;外顯子2和neor基因;生長發(fā)育;不能;雜合子小鼠既有體型正常的,又有發(fā)育遲緩、體型瘦弱的,無法判斷性狀的顯、隱性,所以也無法判斷Ⅰ+、Ⅰ-基因的顯、隱性;父本;母本;-;+;-;野生型:發(fā)育遲緩型=1:1
【解答】
【點評】
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