2020年度諾貝爾獎之化學獎授予EmmanuelleCharpentier、JenniferA.Doudna,二人開發(fā)了基因技術中最銳利的工具之一，被稱為“基因剪刀”的CRISPR-Cs9。利用這些技術，科學家能夠極其精確地改變動物、植物、微生物的DNA。該技術原理是由一條單鏈向?qū)NA（sgRNA，含有與目的基因部分序列配對的單鏈區(qū)）引導Cas9蛋白到一個特定的基因位點進行切割，科研人員將構(gòu)建的含有CaS9基因、切割部位序列設計合成的DNA片段（能合成sgRNA）的重組質(zhì)粒導入豬的成纖維細胞中敲除MSTN基因，以期獲得生長速度快、瘦肉率高的新品種。回答下列相關問題。
（1）據(jù)上述材料推測Cas9蛋白相當于基因工程中的

限制

限制

酶，該蛋白質(zhì)斷開的是目標DNA中的

磷酸二酯鍵

磷酸二酯鍵

。
（2）SgRNA能識別MSTN基因的核苷酸序列必須具有唯一性，目的主要是

為了確保CRISPR-Cs9的定向切割基因位點

為了確保CRISPR-Cs9的定向切割基因位點

。將重組質(zhì)粒導入豬的成纖維細胞常采用

顯微注射

顯微注射

法。
（3）取敲除MSTN基因的成纖維細胞的細胞核與去核的卵細胞構(gòu)建成重組細胞，在對重組細胞進行培養(yǎng)時，需定期更換培養(yǎng)液，其目的是

補充營養(yǎng)物質(zhì)，去除代謝廢物等

補充營養(yǎng)物質(zhì)，去除代謝廢物等

，需培養(yǎng)到

桑葚胚或囊胚時期

桑葚胚或囊胚時期

（填胚胎時期的名稱）進行胚胎移植，移植到受體子宮內(nèi)，胚胎在受體子宮內(nèi)能成活的生理學基礎是

供、受體經(jīng)處理后具有相同的生理周期；早期胚胎與母體是相對獨立的關系；母體僅提供營養(yǎng)，不影響胚胎的遺傳性狀；胚胎移植時排斥（排異）反應很小

供、受體經(jīng)處理后具有相同的生理周期；早期胚胎與母體是相對獨立的關系；母體僅提供營養(yǎng)，不影響胚胎的遺傳性狀；胚胎移植時排斥（排異）反應很小

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