如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn)，ampR為青霉素抗性基因，tctR 為四環(huán)素抗性基因，P啟動(dòng)子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)．已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)．
據(jù)圖回答：
（1）將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒該表達(dá)載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有目的基因-載體連接物目的基因-載體連接物、載體-載體連接物載體-載體連接物、目的基因-目的基因連接物目的基因-目的基因連接物三種．若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行分離純化分離純化．
（2）用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)．之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是載體-載體連接物載體-載體連接物；
（3）目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是啟動(dòng)子啟動(dòng)子，其合成的產(chǎn)物是RNARNA，此過程稱為轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄，原料是核糖核苷酸核糖核苷酸．
（4）在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠEcoRⅠ和BamHⅠ．
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因-載體連接物；載體-載體連接物；目的基因-目的基因連接物；分離純化；載體-載體連接物；啟動(dòng)子；RNA；轉(zhuǎn)錄；核糖核苷酸；EcoRⅠ和BamHⅠ
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：23引用：1難度：0.5
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發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
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