科研小組利用基因工程技術(shù)將“抗蟲基因”轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞成功培育出抗蟲棉，該技術(shù)所用的含“抗蟲基因”的DNA與質(zhì)粒上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示（不同限制酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)：BamHⅠ5'-G↓GATCC-3'，BclⅠ5'-T↓GATCA-3'，Sau3AⅠ5'-↓GATC-3'，HindⅢ5'-A↓AGCTT-3'）。請(qǐng)分析并回答以下問(wèn)題：
（1）將抗蟲基因轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞前，可以通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得大量抗蟲基因，PCR擴(kuò)增抗蟲基因的前提是要測(cè)定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是 便于合成引物便于合成引物。PCR每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性復(fù)性和延伸三步。
（2）由圖1和圖2分析可知，研究人員應(yīng)選擇 HindIII和Sau3AIHindIII和Sau3AI限制酶處理含抗蟲基因的DNA片段，在處理質(zhì)粒的時(shí)候應(yīng)選擇 HindIII和BamHIHindIII和BamHI限制酶。質(zhì)粒DNA中含有的啟動(dòng)子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)。
（3）蛋白酶抑制劑基因也是一種抗蟲基因，某研究團(tuán)隊(duì)將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)化，獲得轉(zhuǎn)基因植株。
①將抗蟲基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)時(shí)，除了采用我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法，還可以采用 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，使用該方法時(shí)，應(yīng)將抗蟲基因插入到質(zhì)粒的 T-DNAT-DNA區(qū)域。
②標(biāo)記基因可用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入，由圖2可知，應(yīng)選含有 X抗生素X抗生素的培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的細(xì)胞。
③圖3為將胰蛋白酶抑制劑（NaPI）和胰凝乳蛋白酶抑制劑（StPin1A）的基因單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，據(jù)結(jié)果分析，NaPINaPI（選填“NaPI”或“Stpin1A”或“NaPI+Stpin1A”）轉(zhuǎn)基因棉花的抗蟲效果最佳，得出該結(jié)論的原因是 飼喂NaPI轉(zhuǎn)基因植物的蟲體質(zhì)量較差，且每株棉鈴蟲數(shù)較最少飼喂NaPI轉(zhuǎn)基因植物的蟲體質(zhì)量較差，且每株棉鈴蟲數(shù)較最少。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】便于合成引物；復(fù)性；HindIII和Sau3AI；HindIII和BamHI；RNA聚合酶；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化；T-DNA；X抗生素；NaPI；飼喂NaPI轉(zhuǎn)基因植物的蟲體質(zhì)量較差，且每株棉鈴蟲數(shù)較最少
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6