H1N1為單鏈RNA病毒,感染人類會引發(fā)甲型流感。對H1N1進(jìn)行基因組測序,發(fā)現(xiàn)HA基因是該病毒的一種特征基因??赏ㄟ^檢測HA基因來檢測待測標(biāo)本中H1N1的含量,過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}。
(1)對H1N1進(jìn)行基因組測序是測定RNA的 核糖核苷酸核糖核苷酸序列。
(2)在過程①和②中,需分別向反應(yīng)體系加 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶和 Taq(“熱穩(wěn)定DNA聚合”或“耐高溫DNA聚合”)Taq(“熱穩(wěn)定DNA聚合”或“耐高溫DNA聚合”)酶。
(3)過程②中對HA基因?qū)?yīng)的cDNA序列進(jìn)行擴(kuò)增,需設(shè)計 22種引物。反應(yīng)體系中加入dATP、dTTP、dCTP和dGTP的作用是 提供反應(yīng)所需的原料和能量提供反應(yīng)所需的原料和能量。
(4)反應(yīng)體系中含有熒光物質(zhì),每擴(kuò)增形成一條DNA鏈,就會出現(xiàn)一定強度的熒光信號?,F(xiàn)欲檢測兩個標(biāo)本中H1N1的含量,可在熒光強度達(dá)到某一設(shè)定值時,觀察比較兩個反應(yīng)體系擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù),若某個標(biāo)本的循環(huán)次數(shù)較少,則其H1N1含量較 多多。
【考點】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】核糖核苷酸;逆轉(zhuǎn)錄;Taq(“熱穩(wěn)定DNA聚合”或“耐高溫DNA聚合”);2;提供反應(yīng)所需的原料和能量;多
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:1引用:2難度:0.7
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( )
A.應(yīng)根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計兩種引物 B.PCR每一循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三個過程 C.PCR結(jié)束后有靶分子的反應(yīng)單位能檢測出熒光 D.每個反應(yīng)單位中都需要加入解旋酶和耐高溫DNA聚合酶 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因,還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物,得到兩個常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物,突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,得到突變目的基因序列?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
(3)如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是( ?。?/h2>
A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān) B.凝膠中DNA分子通過染色,可以在波長300nm的紫外燈下被檢測出來 C.該實驗用到的緩沖液和酶,使用前為加快融化速度,從冰箱取出直接水浴加熱 D.電泳技術(shù)可以用于人類親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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