2020年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予Harvey J．Alter博士、Michael Houghton博士和 Charles M．Rice博士，以表彰他們對丙肝病毒的重要發(fā)現(xiàn)。丙肝病毒（HCV）是一種RNA病毒，人們將得到的HCV的多個抗原基因首尾相連，連接在同一調(diào)控組件下，可構(gòu)成HCV融合基因。經(jīng)基因工程產(chǎn)生出的HCV融合抗原可用于制作第三代HCV抗體檢測試劑?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得融合基因，即以相關(guān)的RNA為模板合成cDNA然后拼接起來，這個過程需要的酶有 逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶。其次要利用PCR技術(shù)擴增融合基因，即先根據(jù)融合基因的核苷酸序列，設(shè)計并合成引物，若該融合基因的序列為
（虛線處省略了部分核苷酸序列），則PCR設(shè)計應(yīng)選用的兩種引物的部分序列應(yīng)分別為：①5'—AACTAT—3'，②5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）。引物能與變性的融合基因單鏈結(jié)合，在 Taq酶Taq酶催化作用下延伸，如此循環(huán)多次。
（2）構(gòu)建表達載體，如圖所示，表達載體上除了標(biāo)注的DNA片段外，在融合基因上游還必須擁有 啟動子啟動子，其作用是 是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA
（3）用含 硫酸卡那霉素硫酸卡那霉素的培養(yǎng)基篩選出能生長的菌落。
（4）抗原蛋白是 HCV融合基因表達HCV融合基因表達的產(chǎn)物，將抗原蛋白注射到動物體內(nèi)，通過 體液體液免疫過程產(chǎn)生抗體，可制作出第三代HCV抗體檢測試劑。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA連接酶；5'—AGAGGC—3'（或3'—CGGAGA—5'）；Taq酶；啟動子；是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動融合基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；硫酸卡那霉素；HCV融合基因表達；體液
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：2難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）。可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進行核移植（克?。梢垣@得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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