曲妥珠單抗是抗Her2的單克隆抗體,用于阻斷癌細胞的生長。如圖為制備單克隆抗體的過程?;卮鹨韵聠栴}:(1)給小鼠注射Her2蛋白進行免疫,在35天獲取B淋巴細胞懸液進行融合。在獲取B淋巴細胞前3天需再次注射Her2蛋白,這樣做的目的是 通過二次免疫使產生的抗Her2抗體的B淋巴細胞增多通過二次免疫使產生的抗Her2抗體的B淋巴細胞增多。
(2)誘導融合獲得的細胞有未融合的親本細胞、融合的具有同種核的細胞和雜交瘤細胞,原因是 細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%。缺失HPRT基因的細胞無法在HAT培養(yǎng)基中增殖,HAT培養(yǎng)基可以篩選出骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合的雜交瘤細胞,其它細胞都會死亡據(jù)此推測,在單克隆抗體制備過程中缺失HPRT基因的細胞是 骨髓瘤細胞骨髓瘤細胞(“B淋巴細胞”或“骨髓瘤細胞”)。HAT培養(yǎng)基篩選得到的雜交瘤細胞的特點是 既能迅速大量增殖,又能產生抗體既能迅速大量增殖,又能產生抗體。
(3)在雜交瘤細胞篩選培養(yǎng)過程中,需在培養(yǎng)基中添加血清,并置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)箱中CO2的作用是 維持培養(yǎng)液的pH維持培養(yǎng)液的pH,篩選特定的雜交瘤細胞的過程利用的原理是 抗原抗體特異性結合抗原抗體特異性結合。
(4)此過程獲得的抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞,可在體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內增殖;若為體外培養(yǎng),則要定期更換培養(yǎng)液,目的是 動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)。
【考點】單克隆抗體及其應用.
【答案】通過二次免疫使產生的抗Her2抗體的B淋巴細胞增多;細胞融合是隨機的,且融合率達不到100%;骨髓瘤細胞;既能迅速大量增殖,又能產生抗體;維持培養(yǎng)液的pH;抗原抗體特異性結合;動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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