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研究人員將大麥細胞的LTP1基因導入啤酒酵母菌中,獲得的啤酒酵母菌可產生LTP1蛋白,并釀出泡沫豐富的啤酒,下圖為轉基因啤酒酵母的生產過程?;卮鹣铝袉栴}:

(1)已知DNA復制時子鏈的延伸方向是5′→3′,圖1中A、B、C、D在不同情況下可以作為引物,在PCR技術中,擴增LTP1基因,必須要有
有一段已知目的基因的核苷酸序列
有一段已知目的基因的核苷酸序列
,以便根據這一序列合成引物。擴增LTP1基因時應該選用圖1中的
B和C
B和C
作為引物。
(2)
基因表達載體的構建
基因表達載體的構建
是實施基因工程的核心。圖2中的B為質粒,質粒和LTP1基因結合形成重組質粒C。重組質粒C在受體細胞中能夠穩(wěn)定存在并發(fā)揮作用,在LTP1基因的首端必須具有
啟動子
啟動子
,尾端必須具有終止子,還必須含有標記基因和目的基因。
(3)為檢測目的基因在受體細胞基因組中的整合情況,首先采用分子雜交技術檢測LTP1基因是否導入成功,需要從轉基因啤酒酵母中提取DNA,用
放射性同位素標記的目的基因(LTPI基因)單鏈
放射性同位素標記的目的基因(LTPI基因)單鏈
作探針與之雜交。還可分別用含有青霉素、四環(huán)素的兩種選擇培養(yǎng)基進行篩選,則有圖2中C導入的酵母菌在選擇培養(yǎng)基上的生長情況是
在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活,但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活
在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活,但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活
。
(4)為檢測轉基因啤酒酵母是否產生LTP1蛋白,除檢測LTP1蛋白是否產生及含量外,還可觀察轉基因啤酒酵母所釀啤酒的
泡沫豐富程度
泡沫豐富程度
進行判斷,若能檢測到LTP1蛋白,但效果差,可能的原因是
LTPI基因表達效率低,合成的LTPI蛋白少
LTPI基因表達效率低,合成的LTPI蛋白少
;若經檢測確定細胞中無LTP1蛋白,可采用PCR技術檢測細胞中的RNA,如果能檢測到mRNA,則可能是
(LTPI基因)未能正常翻譯
(LTPI基因)未能正常翻譯
;如果檢測后確定細胞中無LTP1蛋白的mRNA,但之前能檢測到LTP1基因,則LTP1基因未能正常轉錄的原因可能是
LTPI基因反向插入質粒DNA分子中
LTPI基因反向插入質粒DNA分子中
。

【答案】有一段已知目的基因的核苷酸序列;B和C;基因表達載體的構建;啟動子;放射性同位素標記的目的基因(LTPI基因)單鏈;在含有青霉素的培養(yǎng)基上存活,但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上存活;泡沫豐富程度;LTPI基因表達效率低,合成的LTPI蛋白少;(LTPI基因)未能正常翻譯;LTPI基因反向插入質粒DNA分子中
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14難度:0.5
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  • 1.下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關基因工程的敘述,正確的是(  )

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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細胞內的DNA復制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術擴增目的基因時,使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉基因植株(幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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