美籍華人錢永健、美國(guó)的沙爾菲和日本的下村修因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)．GFP會(huì)發(fā)出綠色熒光，該蛋白質(zhì)在生物工程中有著廣闊的應(yīng)用前景．請(qǐng)據(jù)圖回答相關(guān)問題：

（1）圖中重組質(zhì)粒的形成，需要用限制酶對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行剪切．如果限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)（用“↓”表示）是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-；在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有一個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)．質(zhì)粒和目的基因經(jīng)過上述兩種不同的限制酶處理后，在DNA連接酶的作用下

能

能

（填“能”或“不能”）連接成重組質(zhì)粒，理由是

由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端相同（或可以互補(bǔ)）

由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端相同（或可以互補(bǔ)）

．
（2）在②過程中對(duì)轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞進(jìn)行篩選，比較簡(jiǎn)易的方法是通過設(shè)備檢測(cè)被培養(yǎng)的細(xì)胞

是否發(fā)出綠色熒光

是否發(fā)出綠色熒光

；綠色熒光蛋白在轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞的

核糖體

核糖體

中合成，寫出這一過程中的遺傳信息傳遞圖解：

GFP基因

轉(zhuǎn)錄

mRNA

翻譯

綠色熒光蛋白

GFP基因

轉(zhuǎn)錄

mRNA

翻譯

綠色熒光蛋白

．
（3）在③過程中培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中通常含有

葡萄糖

葡萄糖

、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等．
（4）在核移植過程中，供體細(xì)胞一般要選用傳代到

10

10

代以內(nèi)的轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞，原因是

能保持細(xì)胞正常的二倍體核型

能保持細(xì)胞正常的二倍體核型

；乙兔提供的細(xì)胞應(yīng)是

（次級(jí)）卵母細(xì)胞

（次級(jí)）卵母細(xì)胞

．
（5）錢永健通過

蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)

工程技術(shù)，改變氨基酸排序，造出能吸收并發(fā)出不同顏色光的熒光蛋白，并能讓它們發(fā)光更久、更強(qiáng)烈．