玉米是重要的糧食作物，其葉片細(xì)胞中的 P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米，回答下列問題。
（1）利用PCR技術(shù)以圖 1中的DNA片段為模板擴(kuò)增P基因，需要的引物有

BC

BC

 （從A、B、C、D四種單鏈 DNA片段中選擇）。

（2）培育超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米過程中所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖2所示。強(qiáng)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被

RNA聚合酶

RNA聚合酶

識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用

BamHⅠ和SacⅠ

BamHⅠ和SacⅠ

 酶組合，將片段和Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實驗中的作用是

將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上

將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上

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（3）將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入

潮霉素

潮霉素

進(jìn)行篩選，篩選出的愈傷組織

（再）分化

（再）分化

形成叢芽，最終獲得多個轉(zhuǎn)基因玉米株系。
（4）P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖3所示，不能選擇a4玉米株系作為超量表達(dá) P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究的實驗材料，理由是

a4玉米株系的P蛋白表達(dá)量與野生型玉米差異不顯著

a4玉米株系的P蛋白表達(dá)量與野生型玉米差異不顯著

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