神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)是一種多功能糖蛋白,在多種腫瘤組織中呈高表達(dá),可與血管內(nèi)皮生長因子結(jié)合促進(jìn)腫瘤血管的形成,使腫瘤體積增大??蒲腥藛T通過制備NRP-1單克隆抗體,開展對(duì)小鼠的乳腺癌組織進(jìn)行靶向治療的研究。請(qǐng)分析回答:
(1)制備單克隆抗體涉及的動(dòng)物細(xì)胞工程常用技術(shù)有 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合。
(2)制備時(shí),首先給小鼠注射 NRP-1NRP-1,分離得到B淋巴細(xì)胞。將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合后得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)抗體檢測篩選出能產(chǎn)生 NRP-1抗體的雜交瘤NRP-1抗體的雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔中,從腹水中提取大量的NRP-1單克隆抗體。
(3)為了論證制備的單克隆抗體的治療效果,研究者選擇生長狀況一致的小鼠,分別注射等量的乳腺癌細(xì)胞懸液,經(jīng)飼養(yǎng)后,各小鼠均形成了體積基本相同的腫瘤。
①將上述小鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別注射 NRP-1單克隆抗體溶液NRP-1單克隆抗體溶液、等量的生理鹽水等量的生理鹽水,且每隔3天重復(fù)進(jìn)行相同的注射操作,一段時(shí)間后發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組小鼠的腫瘤體積都小于對(duì)照組,原因可能是 NRP-1單克隆抗體與NRP-1NRP-1單克隆抗體與NRP-1發(fā)生特異性結(jié)合,阻斷了 血管內(nèi)皮生長因子與NRP-1血管內(nèi)皮生長因子與NRP-1的結(jié)合,從而抑制了腫瘤血管生成。
②上述實(shí)驗(yàn)小鼠應(yīng)選用沒有 胸腺胸腺(填器官)的動(dòng)物模型鼠,由于這種鼠存在免疫缺陷,實(shí)驗(yàn)時(shí)可以避免小鼠的免疫系統(tǒng)對(duì)乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行攻擊,從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng);動(dòng)物細(xì)胞融合;NRP-1;NRP-1抗體的雜交瘤;NRP-1單克隆抗體溶液;等量的生理鹽水;NRP-1單克隆抗體與NRP-1;血管內(nèi)皮生長因子與NRP-1;胸腺
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/13 8:0:9組卷:3引用:1難度:0.6
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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