研究表明,無(wú)論是真核生物還是原核生物細(xì)胞中,DNA復(fù)制的起始必須先合成一段長(zhǎng)度約為10個(gè)核苷酸左右的RNA分子作為引物.下圖是驗(yàn)證DNA復(fù)制需要RNA分子作為引物的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,M13噬菌體是一種單鏈環(huán)狀DNA病毒,侵入大腸桿菌后能復(fù)制形成雙鏈環(huán)狀DNA,利福平是一種RNA聚合酶抑制劑.請(qǐng)分析回答:
(1)M13噬菌體的單鏈環(huán)狀DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),首先需要通過(guò)轉(zhuǎn)錄過(guò)程合成一小段RNA,轉(zhuǎn)錄過(guò)程需要的原料是核糖核苷酸核糖核苷酸.若M13噬菌體的單鏈環(huán)狀DNA中各種堿基的含量為:a%A,b%G,c%T和d%C,則雙鏈環(huán)狀DNA中,堿基A的含量為(a%+c%)2(a%+c%)2.
(2)與實(shí)驗(yàn)一相比,實(shí)驗(yàn)二無(wú)M13雙鏈環(huán)狀DNA的原因是利福平抑制了大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)RNA聚合酶的活性,無(wú)法合成RNA作為復(fù)制的引物利福平抑制了大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)RNA聚合酶的活性,無(wú)法合成RNA作為復(fù)制的引物,實(shí)驗(yàn)三有M13雙鏈環(huán)狀DNA的原因是加入利福平之前,大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)已經(jīng)合成的RNA仍能作為復(fù)制的引物加入利福平之前,大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)已經(jīng)合成的RNA仍能作為復(fù)制的引物.
(3)生物體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程中,子鏈延伸需要引物的原因是DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的核酸片段上DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的核酸片段上,子鏈片段在DNA連接酶DNA連接酶作用下連接起來(lái).
(4)PCR技術(shù)通常需要長(zhǎng)度為20~30個(gè)核苷酸的DNA片段作為引物,如果引物過(guò)短,則對(duì)擴(kuò)增結(jié)果的影響是會(huì)擴(kuò)增出更多的非目標(biāo)DNA分子會(huì)擴(kuò)增出更多的非目標(biāo)DNA分子.
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【考點(diǎn)】證明DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn).
【答案】核糖核苷酸;;利福平抑制了大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)RNA聚合酶的活性,無(wú)法合成RNA作為復(fù)制的引物;加入利福平之前,大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)已經(jīng)合成的RNA仍能作為復(fù)制的引物;DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到已有的核酸片段上;DNA連接酶;會(huì)擴(kuò)增出更多的非目標(biāo)DNA分子
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【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:59引用:2難度:0.5
相似題
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1.某實(shí)驗(yàn)室意外獲得一種不能自主合成核苷酸的真核突變細(xì)胞,必須從培養(yǎng)基中獲?。疄榱蓑?yàn)證DNA復(fù)制的原料到底是脫氧核苷酸還是核糖核苷酸,現(xiàn)提供如下實(shí)驗(yàn)方案請(qǐng)補(bǔ)充.
(1)原理:DNA主要分布在
材料:突變細(xì)胞,基本培養(yǎng)基,核糖核苷酸,14C-核糖核苷酸,脫氧核苷酸,14C-脫氧核苷酸,放射性探測(cè)儀.
(2)步驟:第一步:配制等量基本培養(yǎng)基,分為A組、B組.
第二步:
第三步:分別接種等量的突變細(xì)胞,相同且適宜條件培養(yǎng),一段時(shí)間后,分別選取其子代細(xì)胞檢測(cè)放射性.
第四步:A組放射性主要出現(xiàn)在細(xì)胞核,B組放射性主要出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì).
(3)實(shí)驗(yàn)分析并回答,A組和B組子代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)差異的原因:發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:42引用:1難度:0.5 -
2.科學(xué)家運(yùn)用密度梯度離心等方法研究DNA復(fù)制的機(jī)制。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)讓兩組大腸桿菌分別在15NH4Cl培養(yǎng)液和14NH4Cl培養(yǎng)液中繁殖多代,培養(yǎng)液中的氮可被大腸桿菌用于合成四種
(2)實(shí)驗(yàn)一:從含15N的大腸桿菌和含14N的大腸桿菌中分別提取親代DNA,混合后放在100℃條件下進(jìn)行熱變性處理,然后進(jìn)行密度梯度離心,再測(cè)定離心管中混合的DNA單鏈含量,結(jié)果如圖a所示。
熱變性處理導(dǎo)致DNA分子中堿基對(duì)之間的
(3)實(shí)驗(yàn)二:研究人員將含15N的大腸桿菌轉(zhuǎn)移到14NH4Cl培養(yǎng)液中,繁殖一代后提取子代大腸桿菌的DNA(F1DNA),將F1DNA熱變性處理后進(jìn)行密度梯度離心,離心管中出現(xiàn)的兩個(gè)條帶對(duì)應(yīng)圖b中的兩個(gè)峰。若將未進(jìn)行熱變性處理的F1DNA進(jìn)行密度梯度離心,則離心管中只出現(xiàn)一個(gè)條帶。據(jù)此分析,F(xiàn)1DNA由
①兩條15N-DNA單鏈
②兩條14N-DNA單鏈
③兩條既含15N又含有14N的DNA單鏈
④一條15N-DNA單鏈、一條14N-DNA單鏈
⑤雙鏈的F1DNA密度梯度離心結(jié)果只有一個(gè)條帶,排除“全保留復(fù)制”
⑥單鏈的F1DNA密度梯度離心結(jié)果有兩個(gè)條帶,排除“彌散復(fù)制”
⑦圖b與圖a中兩個(gè)峰的位置相同,支持“半保留復(fù)制”發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:5引用:1難度:0.4 -
3.20世紀(jì),有科學(xué)家提出DNA分子半不連續(xù)復(fù)制假說(shuō):DNA分子復(fù)制時(shí),一條子鏈?zhǔn)沁B續(xù)形成的,另一條子鏈不連續(xù)即先形成短鏈片段(如圖1所示)后再連接成長(zhǎng)鏈片段。為驗(yàn)證該假說(shuō),科學(xué)家岡崎進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn):讓T4噬菌體在20℃時(shí)侵染大腸桿菌70min后,將3H標(biāo)記的脫氧核苷酸添加到大腸桿菌的培養(yǎng)基中,在15 s、30 s、60s、120 s時(shí),分離T4噬菌體 DNA并通過(guò)加熱使 DNA全部解旋,再進(jìn)行密度梯度離心,根據(jù) DNA 單鏈片段分布位置確定片段大小,發(fā)現(xiàn)DNA單鏈片段越小,離試管口距離越近。檢測(cè)相應(yīng)位置DNA單鏈片段的放射性強(qiáng)度,結(jié)果如圖2 所示。下列說(shuō)法正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:8引用:1難度:0.7
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