為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將陸地棉的酶D基因與擬南芥葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運肽基因相連，導(dǎo)入油菜葉片細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。
（1）從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，一般用PCR技術(shù)擴增，PCR擴增過程中，需加熱至90?95℃，其目的是使雙鏈DNA解聚為單鏈使雙鏈DNA解聚為單鏈；加熱至70?75℃時，互補鏈可在熱穩(wěn)定DNA聚合（或Taq）熱穩(wěn)定DNA聚合（或Taq）酶的作用下延伸。
（2）如圖甲，選用限制酶CiaⅠCiaⅠ處理兩個基因后再用DNA連接DNA連接酶處理，得到A、DA、D（填圖中字母）端相連的融合基因。
（3）將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T一DNA中，構(gòu)建基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素四環(huán)素（填“氨芐青霉素”、“卡那霉素”、“四環(huán)素”或“鏈霉素”等抗生素）的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。
（4）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜。
（5）在分子水平上，用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法檢驗融合基因是否表達(dá)成功。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】使雙鏈DNA解聚為單鏈；熱穩(wěn)定DNA聚合（或Taq）；CiaⅠ；DNA連接；A、D；基因表達(dá)載體；四環(huán)素；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：3難度：0.6
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1．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。梢垣@得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7