斑馬魚(yú)是一種模式動(dòng)物,體外受精發(fā)育,胚胎透明、便于觀察,可用于水質(zhì)監(jiān)測(cè)、基因功能分析以及藥物毒性與安全性評(píng)價(jià)等。
(1)由于人類活動(dòng)產(chǎn)生的生活污水日益增多,大量未經(jīng)處理的污水直接排入河流、湖泊會(huì)引起水體富營(yíng)養(yǎng)化富營(yíng)養(yǎng)化,導(dǎo)致藻類大量繁殖形成水華。取水樣喂養(yǎng)斑馬魚(yú),可用斑馬魚(yú)每周的體重和死亡率等指標(biāo)監(jiān)測(cè)水體污染程度。
(2)為了研究某基因在斑馬魚(yú)血管發(fā)育過(guò)程中的分子調(diào)控機(jī)制,用DNA連接酶將該基因連接到質(zhì)粒載體形成重組DNA分子重組DNA分子,導(dǎo)入到大腸桿菌菌株DH5α中。為了能夠連接上該目的基因、并有利于獲得含該目的基因的DH5α陽(yáng)性細(xì)胞克隆,質(zhì)粒載體應(yīng)含有限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列、抗生素抗性基因限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列、抗生素抗性基因(答出2點(diǎn)即可)。提取質(zhì)粒后,采用顯微注射顯微注射法,將該基因?qū)氲桨唏R魚(yú)受精卵細(xì)胞中,培養(yǎng)并觀察轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)胚胎血管的發(fā)育情況。
(3)為了獲取大量斑馬魚(yú)胚胎細(xì)胞用于藥物篩選,可用胰蛋白酶胰蛋白酶分散斑馬魚(yú)囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán),取分散細(xì)胞作為初始材料進(jìn)行原代原代培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶中添加成纖維細(xì)胞作為飼養(yǎng)層細(xì)胞飼養(yǎng)層細(xì)胞,以提高斑馬魚(yú)胚胎細(xì)胞克隆的形成率。
【考點(diǎn)】動(dòng)物體細(xì)胞克隆.
【答案】富營(yíng)養(yǎng)化;重組DNA分子;限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列、抗生素抗性基因;顯微注射;胰蛋白酶;原代;飼養(yǎng)層細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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