人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。研究表明，為心梗患者注射大量t-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血，其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高，若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。通過基因工程技術(shù)可以大量制備改良藥物t-PA。
（1）換成決定絲氨酸堿基序列AGA，建構(gòu)t-PA改良基因，該過程為基因工程中 （篩選和）獲取目的基因（篩選和）獲取目的基因步驟。
（2）高純度的DNA模板是成功擴增目的基因的前提條件之一，在制備DNA模板時，可以用高溫處理的方法去除蛋白質(zhì)，原因是 ACAC。（多選）
A.蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)容易破壞
B.氨基酸容易高溫脫氨基
C.DNA氫鍵容易斷裂和恢復(fù)
D.DNA和蛋白質(zhì)可以堿基配對
（3）如圖是用大腸桿菌生產(chǎn)改良t-PA過程中的一個環(huán)節(jié)，需選用限制酶 XmaI和BglIIXmaI和BglII切開質(zhì)粒pCLY11，才能與t-PA改良基因高效連接。將構(gòu)建的表達載體導(dǎo)入大腸桿菌細胞，篩選目標菌落的具體方法為 在加入新霉素的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，篩選呈白色的菌落在加入新霉素的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，篩選呈白色的菌落。
（4）若構(gòu)建乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)改良t-PA，在構(gòu)建表達載體時首先要注意的是 t-PA改良基因與乳腺中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起t-PA改良基因與乳腺中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起，常用 受精卵受精卵作為受體細胞。
【答案】（篩選和）獲取目的基因；AC；XmaI和BglII；在加入新霉素的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌，篩選呈白色的菌落；t-PA改良基因與乳腺中特異表達的基因的啟動子等調(diào)控元件重組在一起；受精卵
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/15 8:0:8組卷：23引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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