請根據(jù)“血紅蛋白的提取和分離”實(shí)驗(yàn),回答下列問題:
(1)血紅蛋白因含有血紅素血紅素(該物質(zhì)中含F(xiàn)e2+)而呈紅色,這有利于對提取過程進(jìn)行監(jiān)測。
(2)在進(jìn)行樣品處理時首先要使用生理鹽水生理鹽水對紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌,目的是去除雜蛋白去除雜蛋白。在該過程中,若離心速度過高和時間過長離心速度過高和時間過長會使白細(xì)胞一同沉淀,達(dá)不到分離的效果。
(3)將洗滌好的紅細(xì)胞倒入燒杯中,加入蒸餾水和甲苯蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白,再通過離心的方法將血紅蛋白從混合液中分離出來。
(4)將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析,透析的原理是透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而將大分子保留在袋內(nèi)透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而將大分子保留在袋內(nèi)。
(5)通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)-一步純化。裝填色譜柱時不能有氣泡存在,因?yàn)?!--BA-->氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果。
(6)最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。加入SDS可以使蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率完全取決于分子的大小分子的大小。
【考點(diǎn)】蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的綜合.
【答案】血紅素;生理鹽水;去除雜蛋白;離心速度過高和時間過長;蒸餾水和甲苯;透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而將大分子保留在袋內(nèi);氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序;分子的大小
【解答】
【點(diǎn)評】
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