科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進行基因工程的操作過程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是一G↓GATCC一,限制酶Ⅱ的識別序列和切點是一↓GATC-,請據(jù)圖回答:
(1)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中,應(yīng)用限制酶ⅠⅠ切割質(zhì)粒,用限制酶ⅡⅡ切割目的基因。用限制酶切割目的基因和載體后形成的黏性末端通過堿基互補配對堿基互補配對原則進行連接。
(2)在過程③中一般將受體大腸桿菌用CaCl2CaCl2進行處理,以增大細(xì)胞壁細(xì)胞壁的通透性,使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進入受體細(xì)胞。
(3)將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,得到如圖a所示的結(jié)果(圓點表示菌落),該結(jié)果說明能夠生長的大腸桿菌中已導(dǎo)入了普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒普通質(zhì)粒或重組質(zhì)粒,反之則沒有導(dǎo)入;再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基a上,使絨布表面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖b所示的結(jié)果(圓圈表示與圖a中培養(yǎng)基上對照無菌落的位置)。與圖b圓圈相對應(yīng)的圖a中的菌落表現(xiàn)型是抗氨芐青霉素但不抗四環(huán)素抗氨芐青霉素但不抗四環(huán)素,這些大腸桿菌中導(dǎo)入了重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】Ⅰ;Ⅱ;堿基互補配對;CaCl2;細(xì)胞壁;普通質(zhì)?;蛑亟M質(zhì)粒;抗氨芐青霉素但不抗四環(huán)素;重組質(zhì)粒
【解答】
【點評】
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