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菁優(yōu)網(wǎng)腦血栓是威脅人類健康的常見疾病,研究發(fā)現(xiàn)人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和腦血栓的急救藥。通過基因工程技術可以大量制備基因工程藥物t-PA。
(1)研究人員采用PCR技術可以獲得大量t-PA基因,PCR的原理是
DNA半保留復制
DNA半保留復制
,此外,除上述外獲得t-PA基因的方法還有
人工合成(或從基因文庫中獲?。?/div>
人工合成(或從基因文庫中獲?。?/div>(答出1種即可)。
(2)研究表明,為心梗患者注射大量t-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血,其原因在于t-PA與纖維蛋白結合的特異性不高,若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,能顯著降低出血副作用。據(jù)此,先對天然的t-PA基因進行序列改造,然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該改造后的基因,可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。(注:如圖乙表示相關的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒,新霉素為抗生素。)請回答下列問題:
①以上制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程被稱為
蛋白質(zhì)工程
蛋白質(zhì)工程
。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA,而絲氨酸的密碼子為UCU,因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應設計為
AGA
AGA
。
②如圖所示,需選用限制酶XmaⅠ和
BglⅡ
BglⅡ
切開質(zhì)粒pCLY11,才能與t-PA改良基因高效連接。與單一酶酶切相比,本操作采用的雙酶切方法的優(yōu)點是
防止載體和目的基因自身環(huán)化以及目的基因和質(zhì)粒反向連接
防止載體和目的基因自身環(huán)化以及目的基因和質(zhì)粒反向連接
。
(3)將連接好的質(zhì)粒DNA導入大腸桿菌,含t-PA改良基因重組質(zhì)粒的細胞應具有的性狀是
C
C
。
A.新霉素抗性且呈藍色
B.新霉素敏感且呈藍色
C.新霉素抗性且呈白色
D.新霉素敏感且呈白色

【答案】DNA半保留復制;人工合成(或從基因文庫中獲?。?;蛋白質(zhì)工程;AGA;BglⅡ;防止載體和目的基因自身環(huán)化以及目的基因和質(zhì)粒反向連接;C
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/2 8:0:8組卷:18引用:3難度:0.5
相似題
  • 1.數(shù)字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術,其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.PCR技術不僅可以擴增目的基因,還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR,其操作步驟為:
    ①根據(jù)目的基因序列設計引物,得到兩個常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
    ②根據(jù)突變堿基所處序列位置設計突變上游引物,突變位點位于突變引物序列的中間位置
    ③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應得到下游大引物;
    ④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增,得到突變目的基因序列。回答下列問題:
    (1)PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關,DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
     
    。該PCR擴增技術所需的基本條件是
     
    種引物、原料、模板、
     

    (2)在第一次PCR反應中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
     
    次復制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的
     
    條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比,該突變技術的優(yōu)點是
     
    。
    (3)如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物,其步驟包括:
     
    、
     
    、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后,需先用
     
    處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入馬鈴薯細胞,將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是
     
    。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉錄出了mRNA,所采用的方法是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6
  • 3.下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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