新冠病毒的抗原性與感染性與其表面的S蛋白（刺突糖蛋白）密切相關(guān)，現(xiàn)利用基因工程的方法生產(chǎn)相關(guān)疫苗。圖甲為構(gòu)建S蛋白基因表達(dá)載體的過(guò)程，圖乙為重組質(zhì)粒被相關(guān)酶切后的電泳結(jié)果。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。
（1）①過(guò)程所使用的酶為 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶，為保證PCR技術(shù)擴(kuò)增S蛋白基因正常進(jìn)行，該反應(yīng)體系的主要成分有 模板DNA、脫氧核苷酸、引物、耐高溫的DNA聚合酶模板DNA、脫氧核苷酸、引物、耐高溫的DNA聚合酶。PCR技術(shù)中低溫復(fù)性的目的是 兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。
（2）通過(guò)PCR技術(shù)可在cDNA分子中專一性擴(kuò)增出S蛋白基因，其原因是 引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的。PCR過(guò)程經(jīng)過(guò)4次循環(huán)，需要的引物的數(shù)量是 3030個(gè)。
（3）構(gòu)建好的重組質(zhì)粒長(zhǎng)度共2000bp,用限制酶HindⅢ及限制酶HindⅢ和BamHⅠ分別對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行切割并電泳，結(jié)果如圖乙所示，可推測(cè)BamHⅠ在重組質(zhì)粒上有 33個(gè)酶切位點(diǎn)。
（4）腺病毒疫苗進(jìn)入人體后，S蛋白基因利用人體細(xì)胞的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)指導(dǎo)S蛋白的合成，其過(guò)程是 S蛋白的cDNA轉(zhuǎn)錄mRNA翻譯蛋白S蛋白的cDNA轉(zhuǎn)錄mRNA翻譯蛋白（用文字和箭頭表示）。
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【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶；模板DNA、脫氧核苷酸、引物、耐高溫的DNA聚合酶；兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合；引物是根據(jù)S蛋白基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的；30；3；S蛋白的cDNAmRNA蛋白
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【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：29引用：3難度：0.7
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物，得到兩個(gè)常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò)次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)經(jīng)過(guò)的兩個(gè)過(guò)程是。檢測(cè)目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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