某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Btl抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列,并運(yùn)用交錯延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強(qiáng)的重組Bt基因,并將其成功導(dǎo)入煙草,過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
注:交錯延伸PCR:基因Btl和Bt2均作為模板,所需引物相同,圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。
(1)啟動子是 RNA聚合RNA聚合酶的識別并結(jié)合部位,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。圖中交錯延伸PCR前,需要進(jìn)行復(fù)性,復(fù)性的溫度一般為 5050℃左右。通過交錯延伸PCR獲得的重組Bt基因同時具有Bt1和Bt2基因序列的原因是第一輪以Bt1為模板合成的子鏈片段在第二輪復(fù)制時,作為引物結(jié)合到 Bt2Bt2(填“Btl”或“Bt2”)的模板上繼續(xù)合成子鏈,經(jīng)多輪交錯循環(huán)擴(kuò)增,使產(chǎn)物同時含有兩種基因的序列。
(2)過程③將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞并用農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞。篩選含有重組Bt基因的細(xì)胞的方法是 向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加草甘膦向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加草甘膦。
(3)過程⑤需要照光培養(yǎng),原因是 光照可誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用光照可誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用。過程④和過程⑤需要用到愈傷組織培養(yǎng)基,發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。在設(shè)計(jì)這三種培養(yǎng)基時最主要的區(qū)別是 植物激素的種類和比例植物激素的種類和比例。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA聚合;使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;50;Bt2;向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加草甘膦;光照可誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用;植物激素的種類和比例
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/8/21 10:0:1組卷:6引用:2難度:0.5
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