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某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Btl抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列,并運(yùn)用交錯延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲性能強(qiáng)的重組Bt基因,并將其成功導(dǎo)入煙草,過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:

注:交錯延伸PCR:基因Btl和Bt2均作為模板,所需引物相同,圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。
(1)啟動子是
RNA聚合
RNA聚合
酶的識別并結(jié)合部位,驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。引物的作用是
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
。圖中交錯延伸PCR前,需要進(jìn)行復(fù)性,復(fù)性的溫度一般為
50
50
℃左右。通過交錯延伸PCR獲得的重組Bt基因同時具有Bt1和Bt2基因序列的原因是第一輪以Bt1為模板合成的子鏈片段在第二輪復(fù)制時,作為引物結(jié)合到
Bt2
Bt2
(填“Btl”或“Bt2”)的模板上繼續(xù)合成子鏈,經(jīng)多輪交錯循環(huán)擴(kuò)增,使產(chǎn)物同時含有兩種基因的序列。
(2)過程③將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌細(xì)胞并用農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞。篩選含有重組Bt基因的細(xì)胞的方法是
向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加草甘膦
向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加草甘膦
。
(3)過程⑤需要照光培養(yǎng),原因是
光照可誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用
光照可誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用
。過程④和過程⑤需要用到愈傷組織培養(yǎng)基,發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。在設(shè)計(jì)這三種培養(yǎng)基時最主要的區(qū)別是
植物激素的種類和比例
植物激素的種類和比例
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】RNA聚合;使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;50;Bt2;向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加草甘膦;光照可誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用;植物激素的種類和比例
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/8/21 10:0:1組卷:6引用:2難度:0.5
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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