下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi),制備“工程菌”的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)獲得A有兩條途徑:一是以A的mRNA為模板,在 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下,合成互補(bǔ)的單鏈DNA,然后在DNA聚合酶的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所需基因;二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的 氨基酸氨基酸序列,推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列,然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,推測(cè)其DNA的 脫氧核苷酸脫氧核苷酸序列,再通過(guò)化學(xué)方法合成所需基因。
(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí),需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有 引物引物、模板模板、4種脫氧核苷酸和 熱穩(wěn)定DNA聚合熱穩(wěn)定DNA聚合酶,擴(kuò)增過(guò)程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成。
(3)基因工程的核心是 基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建,為保證基因A的正常轉(zhuǎn)錄,圖中C上基因A的兩端應(yīng)含有 啟動(dòng)子啟動(dòng)子、終止子終止子。
(4)在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí),常用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌,其目的是使其成為 感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞,有利于吸收重組DNA分子。
(5)基因A轉(zhuǎn)錄和表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)分別采用 分子雜交分子雜交、抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術(shù)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄;氨基酸;脫氧核苷酸;引物;模板;熱穩(wěn)定DNA聚合;基因表達(dá)載體;啟動(dòng)子;終止子;Ca2+;感受態(tài);分子雜交;抗原—抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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