孔雀石綠（簡(jiǎn)稱MG）是廣泛使用的有機(jī)染料，在自然環(huán)境中極難降解，容易引起土壤污染，進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過(guò)量MG的固體培養(yǎng)基不透明。
（1）培養(yǎng)基的配制：MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等，再加 孔雀石綠（MG）孔雀石綠（MG）作為唯一碳源。配制好的培養(yǎng)基，需用 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。
（2）MG高效降解菌株的分離和純化：圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法，用該方法統(tǒng)計(jì)樣品的菌落數(shù)目比活菌的實(shí)際數(shù)目 少少（“少”或“多”），原因是 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。實(shí)驗(yàn)室采用此方法，將1mL樣品稀釋1000倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)正確操作培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為150、158和160．據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)至少為 1.56×1091.56×109個(gè)。
（3）黑曲霉是一種絲狀真菌，黑曲霉的PDA液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基組成為：麩皮、豆粉餅、（NH4）2SO4、MgSO4?7H2O、KH2PO4，培養(yǎng)時(shí)需要通氣振蕩。豆粉餅可提供黑曲霉生長(zhǎng)所需的 碳源和氮源碳源和氮源；若要分離黑曲霉菌落，上述培養(yǎng)基中還需要添加 瓊脂瓊脂，在培養(yǎng)基滅菌前需將pH調(diào)至 酸性酸性（填“酸性”“中性”或“堿性”）。
（4）計(jì)數(shù)黑曲霉菌液孢子濃度的方法為：用多層紗布過(guò)濾黑曲霉培養(yǎng)液得到孢子懸浮液，取1mL懸浮液用無(wú)菌水逐級(jí)稀釋104倍，再取稀釋液滴加至血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（規(guī)格為1mm×1mm×0.1mm,由400個(gè)小格組成）進(jìn)行計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)得到計(jì)數(shù)的小格中平均孢子數(shù)2個(gè)，則黑曲霉培養(yǎng)液中孢子濃度為為 8×10108×1010個(gè)mL-1。
（5）以大豆為主要原料，利用黑曲霉產(chǎn)生的蛋白酶可將原料中的蛋白質(zhì)水解成 小分子肽和氨基酸小分子肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制可得到醬油。
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．
【答案】孔雀石綠（MG）；高壓蒸汽滅菌；稀釋涂布平板法；少；當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落；1.56×109；碳源和氮源；瓊脂；酸性；8×1010；小分子肽和氨基酸
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/26 8:0:9組卷：6引用：2難度：0.6
相似題
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1．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，需經(jīng)細(xì)菌的分解才能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，下列是從土壤中分離分解尿素細(xì)菌的有關(guān)問(wèn)題，請(qǐng)分析回答：
（1）上圖是利用法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種分散逐步到培養(yǎng)基的表面．除此方法外，常用的微生物接種方法還有（寫一種）．
（2）如果要對(duì)培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的是對(duì)接種環(huán)進(jìn)行，灼燒的接種環(huán)冷卻后才能接種的原因是．
（3）下面是兩種培養(yǎng)基的配方：表1：A培養(yǎng)基配方
表2：B培養(yǎng)基配方KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4?7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 H2O 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 1 000mL
①配制培養(yǎng)基的操作步驟纖維素粉 NaNO3 Na2HPO4?7H2O KH2PO4 MgSO4?7H2O KCl 酵母浸膏 H2O 5g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 1 000mL （用字母順序回答）．
a.倒平板 b.計(jì)算 c.溶化 d.稱量 e.滅菌
②通常培養(yǎng)基采用法滅菌，在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，應(yīng)將平板倒置，目的是．
③如果要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)選擇上述（A、B）配方的培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基中加入指示劑，可初步鑒定出該種細(xì)菌能否分解尿素．
④據(jù)B培養(yǎng)基的成分，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是．
（4）尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它們能合成．發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：13引用：2難度：0.5 -
2．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能很好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，某生物興趣小組同學(xué)試圖探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能把尿素高效降解為氨的細(xì)菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟乳下圖所示．請(qǐng)分析回答問(wèn)題．
（1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4?7H2O 0.2g 葡萄糖 10g 尿素 1g 瓊脂 15g 將上述物質(zhì)溶解后，
用自來(lái)水定容到1 000mL，理由是．
（2）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選，這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基．
（3）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的和．
（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選．
（5）下列材料或用具中：
①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿
②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管
③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手
需要滅菌的是：；需要消毒的是：．（填序號(hào)）
（6）實(shí)驗(yàn)結(jié)果后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行處理后，才能倒掉．發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：11引用：1難度：0.5 -
3．致病菌與抗生素。
結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的傳染病。 結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁厚脂質(zhì)含量高，能抵御不利自然環(huán)境，在干痰中可存活 6-8 個(gè)月，若黏附于塵埃上可保持傳染性 8-10 天。人體被感染后結(jié)核分枝桿菌可侵犯全身各組織器官，但以肺部感染最多。
（1）結(jié)核病的傳播途徑主要是。
A、空氣傳播 B、接觸傳播 C、媒介物傳播 D、病媒傳播
（2）根據(jù)病原菌在體內(nèi)的感染部位，推測(cè)結(jié)核分枝桿菌的代謝方式是。
A、異養(yǎng)厭氧型 B、自養(yǎng)厭氧型 C、自養(yǎng)好氧型 D、異養(yǎng)好氧型
為探究不同抗生素對(duì)結(jié)核分枝桿菌的抑菌效果，研究者從患者體內(nèi)提取的病原菌進(jìn)行分離培養(yǎng)。 培養(yǎng)結(jié)核分枝桿菌的培養(yǎng)基主要含有天門冬氨酸、甘油、雞蛋黃、KH2PO4、MgSO4等。
（3）此培養(yǎng)基成分中既能作為氮源同時(shí)提供生長(zhǎng)因子的是。
將分離得到的結(jié)核分枝桿菌進(jìn)行增殖培養(yǎng)后，取細(xì)菌培養(yǎng)液 2 滴涂布于固體培養(yǎng)基上，然后將浸有相同濃度不同種類的抗生素圓紙片置于培養(yǎng)基表面，37℃培養(yǎng) 4 周，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1．其中圓紙片 A、B 分別浸過(guò)抗生素 A 和抗生素 B，圓紙片 C 浸過(guò)抗生素 A、B 的混合物。圖2是細(xì)菌結(jié)構(gòu)示意圖，圖中箭頭表示不同抗生素的作用位置。
（4）欲得到如圖1實(shí)驗(yàn)結(jié)果，接種過(guò)程用到的實(shí)驗(yàn)器材有（多選）。
（5）實(shí)驗(yàn)中圓紙片 D 用作實(shí)驗(yàn)對(duì)照，對(duì)圓紙片D的處理方法是。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，說(shuō)明圓紙片周圍清晰區(qū)大小與抗生素抑菌效果的關(guān)系：，并從抗生素對(duì)細(xì)菌產(chǎn)生的作用解釋圓紙片C周圍清晰區(qū)大于圓紙片A和B的原因。發(fā)布：2024/12/22 8:0:1組卷：33引用：1難度：0.6
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