巴斯德畢赤酵母菌是一種甲醇營養(yǎng)型酵母，能以甲醇作為唯一碳源。啟動(dòng)子（5′AOX1）可在甲醇的誘導(dǎo)下，使外源基因在該種畢赤酵母菌中得到高效表達(dá)?，F(xiàn)擬利用此酵母菌生產(chǎn)人胰島素，請分析并回答下列問題：
（1）由于5′AOX1的首端及其上游堿基序列未知，因此在利用PCR技術(shù)擴(kuò)增5′AOX1之前，進(jìn)行了下圖所示的處理，據(jù)圖回答：①過程使用的兩種酶是 酶1和DNA連接酶酶1和DNA連接酶，②過程利用 酶2酶2（填“酶1”或“酶2”）完成。若用酶1和酶2同時(shí)切割片段2和片段3并將其產(chǎn)物分別進(jìn)行電泳，得到的條帶 相同相同（填“相同”或“不相同”）。
（2）引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。片段3經(jīng)過三輪復(fù)制后，產(chǎn)生的8個(gè)雙鏈DNA片段有 55種。
（3）基因表達(dá)載體中，5′AOX1應(yīng)位于人胰島素基因的 上游上游，是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別與結(jié)合的部位。為使人胰島素基因在畢赤酵母菌中高效表達(dá)，培養(yǎng)基中應(yīng)添加誘導(dǎo)物 甲醇甲醇。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】酶1和DNA連接酶；酶2；相同；使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸；5；上游；RNA聚合酶；甲醇
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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