內(nèi)皮素（ET）是一種多肽，主要通過與靶細(xì)胞膜上的ET受體（ETA）結(jié)合而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)．科研人員通過構(gòu)建表達(dá)載體，實現(xiàn)ETA基因在大腸桿菌細(xì)胞中的高效表達(dá)，其過程如下圖所示，圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為
，限制酶XhoⅠ的識別序列為
．請據(jù)圖分析回答：
（1）進(jìn)行過程①時，需要加入緩沖液、引物、dNTP和 反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）酶等．完成過程①②③的目的是 獲取目的基因（ETA基因）獲取目的基因（ETA基因）．
（2）過程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使 磷酸二酯磷酸二酯鍵斷開，形成的黏性末端是 
．
（3）構(gòu)建的重組表達(dá)載體，目的基因上游的啟動子是 RNA聚合酶識別和結(jié)合RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，進(jìn)而可驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄．除圖中已標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外，基因表達(dá)載體還應(yīng)具有的結(jié)構(gòu)是 終止子終止子．
（4）過程⑥要用CaCl2預(yù)先處理大腸桿菌，使其成為容易吸收外界DNA的 感受態(tài)感受態(tài)細(xì)胞．
（5）將SNAP基因與ETA基因結(jié)合構(gòu)成融合基因，其目的是有利于檢測 ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】反轉(zhuǎn)錄（逆轉(zhuǎn)錄）；獲取目的基因（ETA基因）；磷酸二酯；；RNA聚合酶識別和結(jié)合；終止子；感受態(tài)；ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量
；RNA聚合酶識別和結(jié)合；終止子；感受態(tài)；ETA基因能否表達(dá)及表達(dá)量【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：304引用：8難度：0.5
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識別序列及切割位點，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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