病毒必須寄生在活的宿主細(xì)胞中進(jìn)行增殖，因此培養(yǎng)病毒需要先培養(yǎng)宿主細(xì)胞，再接種病毒。培養(yǎng)細(xì)菌只需要提供含有各種營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基。雙層平板法（如圖）是對噬菌體進(jìn)行檢測、計數(shù)的常用方法，該方法的操作流程為：倒底層平板→倒上層平板→培養(yǎng)→觀察→計數(shù)。請回答下列問題。
（1）底層平板是含2%瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，制備該培養(yǎng)基的一般步驟為：計算→稱量→溶化→調(diào)pH調(diào)pH→分裝、包扎→滅菌滅菌→倒平板；培養(yǎng)細(xì)菌時除了將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或弱堿性外，還要考慮 滲透壓滲透壓等條件，因?yàn)闋I養(yǎng)物質(zhì)濃度太高會使細(xì)胞失水，抑制微生物的生長；濃度太低，則不能滿足微生物生長的需要。
（2）某同學(xué)制作的底層平板凹凸不平，可能的原因是 倒平板時溫度過低，導(dǎo)致部分培養(yǎng)基已經(jīng)凝固倒平板時溫度過低，導(dǎo)致部分培養(yǎng)基已經(jīng)凝固。
（3）倒上層平板時，先將含1%瓊脂的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基滅菌，再冷卻至45～48℃，然后加入細(xì)菌和待測噬菌體稀釋懸液的混合液，充分混勻后迅速倒在底層平板上，隨即旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是 高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌法）高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌法）。培養(yǎng)基滅菌后，冷卻至45～48℃最主要的原因是 避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)皿的目的是 使混合液分布均勻，確保平板平整使混合液分布均勻，確保平板平整。
（4）培養(yǎng)一段時間后，在上層平板上可以看見一些如圖所示的空斑即噬菌斑，出現(xiàn)空斑的原因是 噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡。稀釋度足夠高時，一個噬菌斑來自原液中的一個噬菌體，根據(jù)噬菌斑數(shù)目、稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)及使用稀釋懸液的體積就可推算出待測樣液中噬菌體的數(shù)量。統(tǒng)計的噬菌斑數(shù)往往比噬菌體的實(shí)際數(shù)目低，可能的原因是 一個噬菌斑可能由兩個或多個噬菌體侵染而成（兩個或多個噬菌斑重疊成一個）一個噬菌斑可能由兩個或多個噬菌體侵染而成（兩個或多個噬菌斑重疊成一個）。
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；培養(yǎng)基的配制．
【答案】調(diào)pH；滅菌；滲透壓；倒平板時溫度過低，導(dǎo)致部分培養(yǎng)基已經(jīng)凝固；高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌法）；避免高溫殺死細(xì)菌和噬菌體；使混合液分布均勻，確保平板平整；噬菌體侵染細(xì)菌使其裂解死亡；稀釋倍數(shù)；一個噬菌斑可能由兩個或多個噬菌體侵染而成（兩個或多個噬菌斑重疊成一個）
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/23 12:26:7組卷：6引用：3難度：0.6
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
2．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時間，同時逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計數(shù)時，計數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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