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四環(huán)素被廣泛應(yīng)用于治療動(dòng)物的細(xì)菌感染,但殘留在動(dòng)物組織中的四環(huán)素通過(guò)食物鏈進(jìn)入人體,會(huì)影響人類健康。科研人員獲得了如?圖 1 所示的 DNA 片段,用于構(gòu)建可檢測(cè)四環(huán)素的大腸桿菌。
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(1)啟動(dòng)子 A 和啟動(dòng)子 B都是一段有特殊堿基序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,均含有
RNA聚合
RNA聚合
酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)。
(2)為將片段1和片段2連接,需使用
ClaⅠ和DNA連接酶
ClaⅠ和DNA連接酶
酶處理二者。在答題卡的框中畫(huà)出二者連接后形成的融合基因(標(biāo)注啟動(dòng)子、基因、終止子和酶切位點(diǎn))
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。
(3)為將融合基因構(gòu)建進(jìn)入圖2所示的載體質(zhì)粒中,應(yīng)使用限制酶
SpeⅠ和BamHⅠ
SpeⅠ和BamHⅠ
切割載體質(zhì)粒,用限制酶
XbaⅠ和BamHⅠ
XbaⅠ和BamHⅠ
切割融合基因,選擇上述限制酶的理由是
XbaⅠ和SpeⅠ可切出相同的黏性末端,可將融合基因左側(cè)連入載體;BamHⅠ切割可將融合基因右側(cè)連入載體
XbaⅠ和SpeⅠ可切出相同的黏性末端,可將融合基因左側(cè)連入載體;BamHⅠ切割可將融合基因右側(cè)連入載體

(4)利用Ca2+處理大腸桿菌使之處于
易于接受外源DNA
易于接受外源DNA
的狀態(tài),獲得含有圖示序列的表達(dá)載體。
(5)寫(xiě)出判定轉(zhuǎn)基因大腸桿菌可檢測(cè)的最低四環(huán)素濃度的實(shí)驗(yàn)思路,并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)思路:配制一系列含不同濃度四環(huán)素的培養(yǎng)基用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因大腸桿菌,觀察大腸桿菌中綠色熒光強(qiáng)度。
預(yù)期結(jié)果:能出現(xiàn)綠色熒光的最低四環(huán)素濃度,即為其可檢測(cè)的最低濃度
實(shí)驗(yàn)思路:配制一系列含不同濃度四環(huán)素的培養(yǎng)基用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因大腸桿菌,觀察大腸桿菌中綠色熒光強(qiáng)度。
預(yù)期結(jié)果:能出現(xiàn)綠色熒光的最低四環(huán)素濃度,即為其可檢測(cè)的最低濃度
。

【答案】RNA聚合;ClaⅠ和DNA連接酶;菁優(yōu)網(wǎng);SpeⅠ和BamHⅠ;XbaⅠ和BamHⅠ;XbaⅠ和SpeⅠ可切出相同的黏性末端,可將融合基因左側(cè)連入載體;BamHⅠ切割可將融合基因右側(cè)連入載體;易于接受外源DNA;實(shí)驗(yàn)思路:配制一系列含不同濃度四環(huán)素的培養(yǎng)基用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因大腸桿菌,觀察大腸桿菌中綠色熒光強(qiáng)度。
預(yù)期結(jié)果:能出現(xiàn)綠色熒光的最低四環(huán)素濃度,即為其可檢測(cè)的最低濃度
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/8/26 3:0:8組卷:11引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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